對(duì)硬皮病小鼠模型影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景和目的: 硬皮病是一種病因不明、發(fā)病機(jī)制尚不明確、主要以皮膚或內(nèi)臟器官纖維化、血管異常病變和免疫異常激活為主要特點(diǎn)的自身免疫性結(jié)締組織病。其中纖維化是硬皮病發(fā)病過(guò)程中最突出的特點(diǎn)，也是嚴(yán)重影響病人生活質(zhì)量、甚至危及病人生命的主要威脅。研究表明：UVA能夠穿透表皮、真皮，甚至深達(dá)皮下，對(duì)局部照射部位的組織、細(xì)胞、血管以及DNA等產(chǎn)生影響，從而起到調(diào)節(jié)機(jī)體狀態(tài)和治療疾病的作用。已經(jīng)證實(shí)UVA具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)及改善局部微循環(huán)

2、等作用，在皮膚科其他疾病的治療上已經(jīng)應(yīng)用多年。近幾年，多個(gè)研究已經(jīng)表明應(yīng)用UVA1治療硬皮病患者取得了肯定療效，但對(duì)UVA1治療硬皮病的作用機(jī)制研究關(guān)注較少。 本研究首次在建立博萊霉素硬皮病小鼠模型的基礎(chǔ)上，觀察UVA1照射前后硬皮病小鼠局部注射部位皮膚的外觀變化、病理變化、羥脯氨酸含量及膠原含量變化，并測(cè)定TGFβ1、TGFβ2和decorin等與硬皮病發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)的細(xì)胞因子的變化，試圖探索UVA1治療硬皮病的可能機(jī)制，為

3、進(jìn)一步理解硬皮病的發(fā)病機(jī)制和探索新的治療手段提供重要的參考依據(jù)。 方法: 用300μg/ml的博萊霉素每日注射BALB/c小鼠背部皮膚，連續(xù)28天，進(jìn)行模型構(gòu)建；之后，通過(guò)觀察注射部位皮膚外觀變化、皮損及肺部組織的組織病理變化、羥脯氨酸含量及膠原含量變化來(lái)驗(yàn)證模型構(gòu)建是否成功。用波長(zhǎng)365nmUVA1照射博來(lái)霉素誘導(dǎo)的硬皮病小鼠模型，觀察照射前后局部皮膚變化，組織病理變化、羥脯氨酸含量及膠原含量變化，并用免疫組化法及RT

4、-PCR測(cè)定decorin、TGFβ1及TGFβ2等因子在各組小鼠皮膚的變化。 結(jié)果: 1.從皮膚外觀變化、皮損及肺部組織的組織病理表現(xiàn)、羥脯氨酸含量及膠原含量驗(yàn)證了硬皮病小鼠模型構(gòu)建是成功的。 2.UVA1照射前后，照射組小鼠與模型組小鼠相比，局部硬化皮膚明顯軟化，與皮下粘連明顯減輕；羥脯氨酸含量及膠原含量顯著降低(P＜0.05)；病理示：真皮層變薄，膠原纖維排列疏松，數(shù)量減少；從局部皮膚的外觀變化、皮膚組織病

5、理和羥脯氨酸含量與膠原含量的變化三個(gè)方面均顯示出：UVA1照射可以有效改善硬皮病小鼠的硬化皮膚。 3.通過(guò)測(cè)定UVA1照射前后TGFβ1、’TGFβ2和decorin的變化，顯示出：在UVA1照射前的硬皮病小鼠皮損內(nèi)，TGFβ1、TGFβ2呈陽(yáng)性高表達(dá)，decorin則呈現(xiàn)低表達(dá)；在UVA1照射后的硬皮病小鼠皮損內(nèi)，TGFβ1、TGFβ2呈較顯著的下調(diào)表達(dá)，decorin則呈上調(diào)表達(dá)。 結(jié)論: 1.不僅從外觀上，