肥大心肌細(xì)胞對(duì)AngⅡ誘發(fā)凋亡的易感性及其可能機(jī)理.pdf

1、我們以原代培養(yǎng)的新生大鼠心肌細(xì)胞為基礎(chǔ),對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞予以10nmol/L ET-1作用24h,建立肥大心肌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?經(jīng)HE染色測(cè)量心肌細(xì)胞表面面積,并結(jié)合偶合FITC的鬼筆環(huán)肽熒光染色分析心肌細(xì)胞肥大特征征實(shí)此肥大心肌細(xì)胞模型穩(wěn)定、可靠、重復(fù)性好,可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn).在此模型基礎(chǔ)上,用AngⅡ作用于肥大心肌細(xì)胞24h,采用Hoechst 33258熒光染色和原位缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)進(jìn)行細(xì)胞凋亡的檢測(cè),利用Western blot分

2、析培養(yǎng)細(xì)胞caspase-9和線粒體PDCδ含量的改變,并利用底物顯色法測(cè)量caspase-3的活性變化.該研究觀測(cè)了ET-1和AngⅡ?qū)π募〖?xì)胞肥大和凋亡率的影響,建立了心肌細(xì)胞肥大模型,證實(shí)了肥大心肌細(xì)胞凋亡易感性增加,發(fā)現(xiàn)肥大心肌細(xì)胞凋亡過程中伴有PKCδ向線粒體的轉(zhuǎn)位和caspase-9、caspase-3活性增強(qiáng).該研究在上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上提出肥大心肌細(xì)胞的凋亡是由線粒體凋亡途徑介導(dǎo)的,PKCδ向線粒體的轉(zhuǎn)位是線粒體凋亡途徑激