復(fù)方中藥注射液“回陽液”的研制.pdf

1、目的:本試驗以人參、麥冬等數(shù)味中藥所配成的復(fù)方中藥,在提取中藥有效部位和有效成分的基礎(chǔ)上,主要采用傳統(tǒng)的水提醇沉工藝制成3批復(fù)方中藥注射液“回陽液”(以下簡稱回陽液),批號為050315、050320、050325,并對其質(zhì)量、安全性、急性毒性和療效分別進行了研究。
　　 方法:按中藥注射液的質(zhì)量要求,通過檢測其pH、鞣質(zhì)、穩(wěn)定性以及無菌檢查等對回陽液進行了質(zhì)量評定的研究；其中采用高效液相色譜法(HPLC)測定3批回陽液中人參皂

2、苷Rb1含量；回陽液的安全性與急性毒性研究采用熱原試驗、局部刺激性試驗、溶血試驗、過敏試驗、經(jīng)口急性毒性試驗、腹腔注射急性毒性試驗等試驗方法進行；采用小鼠冰水游泳試驗研究回陽液對小鼠體力和抗應(yīng)激能力的影響；最后通過復(fù)制急性失血性休克和內(nèi)毒素性休克的病理模型來觀察回陽液對休克犬的心率、平均動脈壓及血清尿素氮、肌酐、總膽固醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶的影響,探索該制劑的藥理作用。
　　 結(jié)果:回陽液的質(zhì)量檢查結(jié)果表明,3批回

3、陽液均符合中藥注射液的質(zhì)量要求,不含鞣質(zhì),無菌,平均pH為6.53±1.18；用HPLC法測定回陽液中的人參皂苷Rb1含量,其線性范圍在53μg·ml-1～127.2μg·ml-1范圍內(nèi),相關(guān)系數(shù)r=0.9998,平均回收率為99.94±3.47％,RSD=3.47％(n=5)；3批回陽液中人參皂苷Rb1的平均含量分別為0.778±0.007mg·ml-1,RSD=0.934％；0.721±0.006mg·ml-1,RSD=0.825％

4、;0.798±0.01mg·ml-1,RSD=1.274％。回陽液的穩(wěn)定性試驗結(jié)果為回陽液的顏色、澄明度和pH對熱穩(wěn)定,其中人參皂苷Rb1含量隨溫度、時間變化符合一級降解反應(yīng),其在25℃的反應(yīng)速度常數(shù)K25℃=4.4151×10-6,有效期為2.725a?；仃栆旱陌踩院图毙远拘栽囼灲Y(jié)果表明,回陽液熱原檢查符合2000年版《中華人民共和國獸藥典》的相關(guān)規(guī)定；局部刺激性極小,僅引起注射局部肌肉組織輕度充血；回陽液不引起紅細(xì)胞溶血或凝聚且不

5、引起過敏反應(yīng)。在經(jīng)口毒性試驗中,小鼠無一死亡；腹腔注射的LD50為56.30ml·kg-1,95％可信限為46.15ml·kg-1～62.27ml·kg-1?；仃栆耗苎娱L小鼠在冰水中的游泳時間,與對照組相比差異極顯著(P<0.01)；犬失血性休克模型其MAP下降并維持在5.33kPa(40mmHg)～6.67kPa(50mmHg),30min不能回升；與對照組相比,回陽液能迅速升高休克犬的平均動脈壓(MAP)、左室內(nèi)壓峰值(LVSP)、

6、左室舒張末期壓力(LVEDP)、左室內(nèi)壓最大變化速率(±dp/dtmax)(P<0.05,P<0.01),降低血清中的尿素氮(BUN)、肌酐(CR)、總膽固醇(T-CHOL)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酸激酶(CK)含量(P<0.05,P<0.01)?；仃栆簩?nèi)毒素性休克犬亦有相似的治療作用,與對照組相比能迅速升高休克犬的HR、MAP、INSP、LVEDP、±dp/dtmax(P<0.05,P<0.01)。降低血清中

7、的BUN、CR、T-CHOL、GPT、GOT、CK含量(P<0.05,P<0.01)。
　　 結(jié)論:回陽液符合中藥注射液關(guān)于澄明度、鞣質(zhì)、pH、無菌等質(zhì)量要求；用HPLC對其中人參皂苷Rb1的含量測定可作為其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)之一；該制劑安全、毒性小、刺激性小,可用于靜脈、肌肉、腹腔給藥;回陽液可增強小鼠的體力和抗寒冷應(yīng)激能力；回陽液對失血性和內(nèi)毒素性休克休克犬的心臟、腎臟和肝臟功能均有一定的保護作用,能有效延緩休克的惡化,提高休克犬