雷帕霉素對肺癌LK2細(xì)胞microRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　研究藥物雷帕霉素作用于非小細(xì)胞肺癌LK2細(xì)胞后microRNA表達(dá)的變化。
　　方法：
　　于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)非小細(xì)胞肺癌LK2細(xì)胞，加入終濃度為1umol/L的雷帕霉素溶液，采用加入等量的RPMI-1640培養(yǎng)基作為陰性對照，在培養(yǎng)溫箱中過夜培養(yǎng)48小時之后，在培養(yǎng)瓶內(nèi)加入1ml試劑Trizol，并使其充分接觸細(xì)胞，從肺癌LK2細(xì)胞中提取RNA后，首先制備cDNA文庫，將cDNA文庫上機測序。采用了Illum

2、ina HiSeqTM 2500 microRNA測序方法進(jìn)行microRNA測序，檢測雷帕霉素作用于非小細(xì)胞肺癌LK2細(xì)胞后其中的microRNA的表達(dá)變化，并將其中表達(dá)有顯著差異改變的microRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測，將與細(xì)胞增殖和凋亡相關(guān)的基因篩選出來進(jìn)行靶基因預(yù)測。
　　結(jié)果：
　　與對照組相比，Illumina HiSeqTM 2500 miRNA測序顯示，雷帕霉素作用于非小細(xì)胞肺癌LK2細(xì)胞后microRNA的表達(dá)

3、有變化。實驗中我們能夠發(fā)現(xiàn)有9個microRNAs表達(dá)具有高顯著差異，其中miR-320c，miR-1283，miR-29b-3p，miR-181c-5p，miR-24-3p，miR-26a-5p的表達(dá)顯著增強。而miR-320b，miR-19b-3p，miR-181c-6p表達(dá)明顯降低。通過預(yù)測了上述microRNA的與細(xì)胞增殖及凋亡相關(guān)靶基因，得到例如有PAX3，HMGB2等靶基因。
　　結(jié)論：
　　雷帕霉素作用于非小細(xì)