纖維蛋白凝膠復(fù)合rhBMP2及骨髓基質(zhì)干細(xì)胞應(yīng)用于兔脊柱融合的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、　　目的：本實(shí)驗(yàn)采用FG、MSCs及rhBMP2(以下簡(jiǎn)稱BMP)構(gòu)建組織工程骨，進(jìn)行兔橫突間脊柱融合。通過(guò)影像學(xué)、生物力學(xué)及組織學(xué)等方法檢測(cè)脊柱融合情況，以期為脊柱融合提供更為有效的方法?！　》椒ǎ豪妹芏忍荻入x心法分離獲取幼兔股骨MSCs，以1×106/ml接種于培養(yǎng)瓶中，3天后第一次換液，以后隔天換液。待原代培養(yǎng)細(xì)胞融合成單層后，1：3傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)時(shí)使用條件培養(yǎng)液，其中含10﹪胎牛血清，VitC50μmol/L，β-甘油磷

2、酸鈉10mmol/L，地塞米松10-8mol/L。倒置顯微鏡下觀察MSCs形態(tài)及生長(zhǎng)情況。對(duì)傳代培養(yǎng)3天的MSCs進(jìn)行HE染色，觀察MSCs染色后的形態(tài)；培養(yǎng)14天后進(jìn)行鈣鈷法(Gomori)染色，觀察.MSCs的ALP表達(dá)情況，并計(jì)算陽(yáng)性率；培養(yǎng)28天后進(jìn)行Vonkossa染色，觀察MSCs鈣質(zhì)分泌；繪制第三代傳代細(xì)胞生長(zhǎng)曲線?！　〗Y(jié)論：1.FG是較合適的組織工程載體。2.FG、MSCs及BMP構(gòu)建的組織工程骨對(duì)腰椎橫突間融合有較好

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