電針“內(nèi)關(guān)”、“神門”對(duì)焦慮模型大鼠下丘腦、垂體心房利鈉肽作用機(jī)理研究.pdf

1、目的：本課題研究電針“內(nèi)關(guān)”、“神門”對(duì)焦慮模型大鼠下丘腦、垂體利鈉肽的影響，探索針刺“寧心安神”治療焦慮障礙的中樞利鈉肽作用機(jī)理，為針刺“寧心安神”抗焦慮的神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)制研究提供前期科學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法：選用清潔級(jí)SD雄性大鼠，按體重完全隨機(jī)分為三組，即空白組、模型組和針刺組。參照文獻(xiàn)建立慢性不可預(yù)知應(yīng)激焦慮動(dòng)物模型（Chronic unpredictable stress，CUS）。取單側(cè)“內(nèi)關(guān)”、“神門”針刺，每隔一天一

2、次，左右交替。疏密波，頻率15/25 Hz，每次15min，刺激強(qiáng)度以大鼠針刺側(cè)輕微抖動(dòng)為度。通過高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)（elevated plus maze test，EPM）、敞箱實(shí)驗(yàn)（open-field test，OFT）對(duì)各組大鼠進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試，運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)下丘腦與垂體區(qū)心房利鈉肽（atrial natriuretic peptide,ANP）及其受體（natriuretic peptide receptor，NPRA），以及

3、下丘腦室旁核促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（Corticotropin-Releasing Hormone，CRH）表達(dá)，利用原位雜交技術(shù)檢測(cè)下丘腦與垂體ANPmRNA的表達(dá)，利用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（Enzyme-linked immunosorbent assay，Elisa）來檢測(cè)血漿皮質(zhì)酮(Corticosterone，CORT）含量。
　　結(jié)果：
　　1、行為學(xué)測(cè)試結(jié)果：（1）EPM：OE％值，模型組相比空白組有明顯降低（

4、P＜0.05），針刺組較模型組有明顯升高（P＜0.05）；OT%值，組間比較未現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但模型組相比空白組有所下降，而針刺組較模型組有上升趨勢(shì)。（2）OFT：垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)，模型組較空白組有下降趨勢(shì)，而針刺組相比模型組有上升趨勢(shì)。針刺治療后，OE%值到達(dá)正常，其余行為學(xué)指標(biāo)總體趨于或接近正常。
　　2、下丘腦各組ANP相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果：（1）ANP：與空白組相比，模型組ANP水平明顯低于空白組（P＜0.05）；與模型組比較，針刺

5、組ANP水平顯著高于模型組（P＜0.01）。（2）NPR-A：各組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，模型組與空白組相比，下丘腦NPR-A表達(dá)有降低趨勢(shì)，針刺組相比模型組則有升高趨勢(shì)，針刺組趨向空白組。（3）NPR-AmRNA：各組比較的趨勢(shì)同指標(biāo)NPRA。
　　3、垂體各組ANP相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果：（1）ANP：模型組和針刺組與空白組ANP水平均有顯著增高（P=0.01）。（2）NPR-A：三組NPR-A水平相比沒有顯著性差異，但針刺組更靠近空白組

6、。（3）NPR-AmRNA：模型組和空白組相比有降低趨勢(shì)，而針刺組相比空白組降低明顯（P＜0.01）。
　　4、HPA軸相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果：（1）下丘腦CRH：模型組較空白組CRH水平顯著增加（P＜0.05），而針刺組較模型組明顯降低（P＜0.05），針刺組CRH水平接近正常。（2）血漿CRH：血漿中CRH水平在三組間比較也沒有顯著性差異，但模型組與空白組相比有增高傾向，針刺組相比模型組血漿CRH有下降趨勢(shì)，針刺組接近正常水平。（3