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1、腎臟缺血再灌注性損傷(IRI)是引起急性腎功能不全(ARF)的主要原因之一,也是造成早期腎臟移植功能障礙的主要原因之一。盡管目前治療技術(shù)有了明顯的進(jìn)步,但是與ARF有關(guān)的死亡率仍然很高,近50年來(lái)未明顯降低。經(jīng)初步實(shí)驗(yàn)篩選發(fā)現(xiàn)中藥Qc具有顯著的防治腎臟IRI的活性。 目的:篩選QC抗IRI活性的有效部位,穩(wěn)定制備工藝,以便用于臨床預(yù)防和治療缺血性AIRF,改善移植腎臟功能。 方法:1.以95%乙醇、60%乙醇以及水依次對(duì)
2、原藥材進(jìn)行浸提,醇沉法進(jìn)一步分離其水提取產(chǎn)物,分別獲得提取產(chǎn)物Fl、F2、F3以及水溶性提取產(chǎn)物Sl、S2。2.雄性SD大鼠24只隨機(jī)分為4組,各組分別給予生理鹽水、Fl藥液、F2藥液、F3藥液灌胃,劑量lml/l00g,每日早晚各一次,連續(xù)灌胃三日。第4日晨灌胃1h后,建立右腎切除,左側(cè)腎蒂夾閉45min,再灌注24h的IRI模型,再灌注24h取血測(cè)定血尿素氮(BUN)、肌苷(Cr)。3.雄性SD大鼠18只隨機(jī)分為3組,各組分別給予生
3、理鹽水、SI藥液、S2藥液灌胃,劑量1ml/100g,每日早晚各一次,連續(xù)灌胃三日。第4日晨灌胃1h后,建立右腎切除,左側(cè)腎蒂夾閉45min,再灌注24h的IRI模型,再灌注24h取血測(cè)定血尿素氮(BUN)、肌苷(Cr)。腎臟切片做HE染色,比較腎臟病理變化。4.苯酚.硫酸比色法測(cè)定sl多糖含量,考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定Sl蛋白質(zhì)含量。5.以水提取過(guò)程中的加水量、煎煮時(shí)間和煎煮次數(shù)為優(yōu)選因素,采用L9(34)正交設(shè)計(jì)方案制備Sl,并測(cè)定不同水平
4、組合下的Sl產(chǎn)率和多糖含量。不同濃度水提取液醇沉制備Sl,測(cè)定Sl的產(chǎn)率和多糖含量。 結(jié)果:1.與病理對(duì)照組比較,Sl顯著降低大鼠缺血再灌注24h后的BUN、Cr水平,減輕腎臟組織的病理?yè)p傷。2.S1多糖含量為5533%,蛋白質(zhì)含量為1.02%。3.煎煮時(shí)間和煎煮次數(shù)對(duì)Sl產(chǎn)率有顯著影響,水提取液濃度對(duì)Sl產(chǎn)率有影響。 結(jié)論:QC抗IRI的有效部位為QC經(jīng)水提醇沉所得產(chǎn)物sI,其主要成分為多糖,最佳的制備工藝為:加水量1
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