急性百草枯中毒血清細胞因子動態(tài)變化規(guī)律及治療的實驗研究.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分 急性百草枯中毒血清細胞因子動態(tài)變化規(guī)律的研究 背景：百草枯(paraquat，PQ)，國內商品名為克無蹤。其中毒引起的病死率很高，國外報道病死率為40％～50％，而國內個別報道高達80％以上。百草枯進入人體可使肺、腎、肝和腎上腺出現(xiàn)損傷，而其中毒的特征性改變是肺損傷，表現(xiàn)為早期肺泡上皮細胞受損，肺泡內出血水腫，炎癥細胞浸潤，晚期則出現(xiàn)肺泡內和肺間質纖維化，這種表現(xiàn)被命名為“百草枯肺”，是急性

2、呼吸窘迫綜合征(ARDS)的一種變異形式，也是 PQ 中毒患者的主要死亡原因。而近年來，肺纖維化機制研究取得了許多非常重要的進展，特別是肺內的多種類型細胞以及細胞因子在這一復雜過程中所起的作用引人注目，從而提出了肺細胞及細胞因子網(wǎng)絡的概念。肺泡巨噬細胞及其他肺結構細胞合成的各種細胞因子如腫瘤壞死因子(tumor neciosis factor，TNF—α)、白細胞介素-1β(interleukin—1，IL—1β)、IL-6、IL-10

3、等在肺纖維化機制研究中取得了非常重要的進展。然而，有關百草枯中毒導致的上述細胞因子的變化未見報道。 目的：觀察細胞因子腫瘤壞死因子-α(TNF—α)、白細胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、在急性百草枯中毒動物模型中的變化規(guī)律，探討百草枯中毒急性肺損傷的作用機制。 方法： 72只Wistar大鼠隨機分為對照組、百草枯高劑量染毒組(120 mg/kg)、中劑量染毒組(60 mg/kg)、低劑量染毒組(30 mg/k

4、g)，分為8、24、72 h 3個觀察時段，觀察不同劑量組在染毒后不同時間大鼠靜脈血細胞因子 IL-1β、IL-6、IL-10、TNF—α的動態(tài)變化。 結果： 8、24、72 h各劑量組細胞因子的水平均增加，24、72 h組與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05或 P<0.01 )。72 h高劑量組各指標與同時間點低劑量組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。72 h高、中、低3個劑量組與8 h時間點比較差異有統(tǒng)計學意義

5、(P<0.05)。隨染毒濃度的增加，細胞因子水平逐漸增加。隨時間的延長，細胞因子的水平也在逐漸增加，存在一定的線性趨勢，在整個試驗過程中表現(xiàn)出動態(tài)的變化。 結論：在百草枯中毒急性肺損傷機制中細胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α可能起到了重要作用。 第二部分 血必凈注射液治療急性百草枯中毒的實驗研究 背景：百草枯(paraquat，PQ)又名克蕪蹤、對草快，是一種目前廣泛使用的快速滅生性除草劑，噴灑

6、后能很快發(fā)揮作用，接觸土壤后迅速失活，一般在土壤中無殘留。正常使用情況下對野生動物和環(huán)境少有危害，正確的使用對噴灑作業(yè)人員的健康影響也不大。但PQ如經(jīng)皮膚接觸、呼吸道吸入及誤服時，對人畜有較強毒性，均可造成急性中毒。PQ中毒是當前內科常見的急危重癥，病死率可達60.3％-87.8％。PQ進入人體可使肺、腎、肝、心臟、腦和消化道出現(xiàn)損傷，患者最終多死于多臟器功能衰竭或呼吸衰竭。百草枯(paraquat，PQ)，國內商品名為克無蹤，進入人體

7、后即發(fā)揮毒性作用，而其中毒的特征性改變是肺損傷，表現(xiàn)為早期肺泡上皮細胞受損，肺泡內出血水腫，炎癥細胞浸潤，晚期則出現(xiàn)肺泡內和肺間質纖維化，這種表現(xiàn)被命名為"百草枯肺"，是急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)的一種變異形式，也是PQ中毒患者的主要死亡原因。而近年來，肺纖維化機制研究取得了許多非常重要的進展，特別是肺內的多種類型細胞以及細胞因子在這一復雜過程中所起的作用引人注目，從而提出了肺細胞及細胞因子網(wǎng)絡的概念。肺泡巨噬細胞及其他肺結構細胞合

8、成的各種細胞因子如腫瘤壞死因子一Q(TNF-α)、白細胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β、血小板衍生生長因子(PDGF)、胰島素樣生長因子-1(IGF-1)等在肺纖維化機制研究中取得了非常重要的進展，并發(fā)揮重要的作用。血必凈注射液是以古方血府逐瘀湯為基礎，反復精煉篩選出的靜脈制劑，用于治療全身炎癥反應綜合征(SIRS)和多臟器功能障礙綜合征(MODS)，取得較好的療效。作者在臨床上曾嘗試應用血必凈為主治療百草枯中毒患者，初步顯示

9、較好的療效，然而其作用機制尚不清楚。本研究即細胞因子角度出發(fā)，探討血必凈注射液對百草枯中毒的治療保護作用機制。 目的：探討血必凈注射液對急性百草枯大鼠中毒臟器損害的治療保護機制。 方法：成年Wistar大鼠隨機分為百草枯250mg/kg劑量染毒對照組、百草枯250mg/kg劑量染毒+血必靜注射液高劑量治療組(1.72g生藥/kg)、百草枯250mg/kg劑量染毒+血必靜注射液低劑量治療組(0.86g生藥/kg)3組。取原

10、液加蒸餾水稀釋至1ml灌胃染毒。治療組于染毒后1小時經(jīng)鼠尾靜脈給予相應劑量的血必靜注射液緩慢注射，觀察染毒組和治療組動物表現(xiàn)。染毒8小時后處死動物，留取動靜脈血及大鼠肺組織，行動脈血氣分析、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、堿性磷酸酶(AKP)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β、血小板衍生生長因子(PDGF)、胰島素樣生長因子-1(IGF-1)測定，同時行常規(guī)病理觀

11、察。 結果：血必凈注射液治療組大鼠動脈血氣指標Pa02、PaC02、pH值明顯好于非治療染毒組，有顯著性差異(P<0.05或0.01)。治療組肝腎損害減輕，表現(xiàn)為ALT升高幅度較小，有顯著性差異(P<0.05)，血肌酐變化治療組明顯小于非治療組，有顯著性差異(P<0.05)。細胞因子TNF-α、IL-6血必凈治療組與染毒組比較無顯著性差別(P> 0.05)，而IL-10、IL-1β、PDG、IGF-1高劑量血必凈治療組均明顯小于