芒果苷及其衍生物對(duì)細(xì)胞和斑馬魚(yú)的輻射防護(hù)效應(yīng)及作用機(jī)理初探.pdf

1、人類(lèi)自進(jìn)入核時(shí)代起，就開(kāi)始尋求能在核事故中起到防護(hù)作用或在放療期間保護(hù)正常組織、增加腫瘤放射敏感性的化學(xué)品。動(dòng)物和人類(lèi)，都暴露在天然或人為來(lái)源的電離輻射，如鐳射氣、宇宙射線(xiàn)以及核醫(yī)學(xué)。電離輻射對(duì)生物體構(gòu)成的損傷，主要來(lái)自直接作用和間接作用，其中間接作用引起的損傷占輻射損傷的70-80％左右。這種間接作用通過(guò)輻解水產(chǎn)生大量的自由基進(jìn)而對(duì)機(jī)體組織和器官造成損傷。這種由輻射引起的氧化應(yīng)激是許多疾病的關(guān)鍵成因：如甲狀腺癌、皮膚癌、乳腺癌以及白血

2、病等。尋找和篩選已有抗氧化劑，緩解或清除輻射所致的大量自由基，提高機(jī)體抗放能力，仍是生物醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。幾類(lèi)經(jīng)典的輻射防護(hù)劑在動(dòng)物和細(xì)胞中的防護(hù)效果及毒性都已被廣泛研究：內(nèi)源性的抗氧化劑，如超氧化物歧化酶，可被用于特定的放射治療步驟；天然抗氧化劑，如維生素E和硒，對(duì)由電離輻射誘導(dǎo)的損傷和死亡效果不如WR-2721和WR-151327等硫醇類(lèi)化合物，但毒副作用小，治療范圍較廣；一些具有抗氧化性質(zhì)的藥物單獨(dú)使用或和其它輻射修飾劑聯(lián)合使用亦可

3、被用作輻射防護(hù)劑?？偟膩?lái)說(shuō)，現(xiàn)有輻射防護(hù)藥仍然存在或是防護(hù)作用太弱，或是毒副作用太多等許多不足。
　　 芒果苷是從知母中分離得到的多酚羥基二苯并吡喃酮類(lèi)化合物，具有廣泛的生物活性：抗氧化、抗炎、抗病毒止痛以及免疫調(diào)節(jié)等特性。有人研究表明，芒果苷苷元可以減少大鼠腸道腫瘤，它可能對(duì)腸道細(xì)胞有特殊的防護(hù)敏感性；Jagetia GC教授等報(bào)道，芒果苷可提高受照小鼠的存活率并減輕外周血淋巴細(xì)胞的微核率和細(xì)胞DNA損傷。受此啟發(fā)，我們合成了

4、一系列芒果苷衍生物，以人腸上皮細(xì)胞和斑馬魚(yú)為輻射防護(hù)效果觀察觀察對(duì)象，希望從中篩選出一些毒性低、防護(hù)效果好，有研發(fā)前景的新化合物，并且對(duì)其作用機(jī)理進(jìn)行初步探討。
　　 研究?jī)?nèi)容：
　　 1、芒果苷及其衍生物對(duì)細(xì)胞的輻射防護(hù)活性初篩
　　 以細(xì)胞活力為觀察指標(biāo)，研究芒果苷及衍生物對(duì)受一定劑量γ射線(xiàn)照射的HIEC(人腸上皮細(xì)胞)和3T3細(xì)胞的保護(hù)效應(yīng)，通過(guò)細(xì)胞存活率的分析初步篩選出具有最佳輻射防護(hù)效果的化合物。

5、>　　 2、芒果苷類(lèi)化合物濃度與輻射防護(hù)作用之間的關(guān)系
　　 選取2種在初篩階段顯示輻射防護(hù)效果好的芒果苷類(lèi)化合物(芒果苷苷元和芒果苷)，分別觀察不同藥物濃度對(duì)多種照射劑量HIEC細(xì)胞的輻射防護(hù)作用，包括：
　　 ①不同濃度的兩藥物對(duì)不同γ射線(xiàn)照射劑量下細(xì)胞存活率的影響；
　　 ②不同濃度的兩藥物對(duì)不同Y射線(xiàn)照射劑量下細(xì)胞克隆形成率的影響；
　　 ③一定濃度的兩藥物對(duì)照射后細(xì)胞凋亡率的影響。
　　

6、 3、芒果苷苷元對(duì)斑馬魚(yú)的輻射防護(hù)效應(yīng)
　　 以斑馬魚(yú)為整體動(dòng)物模型，主要研究：
　　 ①顯微注射芒果苷苷元和芒果苷對(duì)不同輻射劑量下不同發(fā)育時(shí)期的斑馬魚(yú)胚胎存活率的影響；
　　 ②兩藥物對(duì)一定輻射劑量下斑馬魚(yú)胚胎孵化率和畸變率的影響；
　　 ③兩藥物對(duì)一定輻射劑量下斑馬魚(yú)組織器官形態(tài)的影響。
　　 4、芒果苷類(lèi)化合物輻射防護(hù)的潛在機(jī)制研究
　　 從自由基和DNA損傷兩方面進(jìn)行初步探討：<

7、br>　　 ①芒果苷苷元及芒果苷清除羥自由基(·OH)的能力；
　　 ②兩藥物對(duì)輻射引起的DNA雙鏈斷裂的影響，檢測(cè)其是否可減輕輻射誘導(dǎo)的基因毒性。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：
　　 1、芒果苷及所有衍生物合成制備：由第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院有機(jī)化學(xué)教研室合成、制備和結(jié)構(gòu)確認(rèn)。所有化合物均溶解于DMSO中，初始濃度為10mg/mL。使用前用雙蒸水或RPMI1640培養(yǎng)基稀釋到所需濃度。
　　 2、細(xì)胞培養(yǎng)：人腸上皮細(xì)胞

8、(HIECs)和小鼠3T3細(xì)胞(本實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期培養(yǎng))。細(xì)胞培養(yǎng)條件：RPMI1640培養(yǎng)基(Invitrogen公司)，10％胎牛牛血清(Hyclone公司)，37℃，5％CO2，飽和濕氣，在細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育。
　　 3、動(dòng)物培養(yǎng)：成年斑馬魚(yú)為市售野生型斑馬魚(yú)(體長(zhǎng)大于3cm)，胚胎從上海長(zhǎng)海醫(yī)院心內(nèi)科實(shí)驗(yàn)室獲得，按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程飼養(yǎng)。飼養(yǎng)條件：光照周期為14h/10h(晝/夜)，水溫(28±1)℃。
　　 4、γ射線(xiàn)照射

9、：細(xì)胞或動(dòng)物提前給予藥物預(yù)處理后，用60Coγ射線(xiàn)照射不同劑量，劑量率為1.0Gy/min(第二軍醫(yī)大學(xué)輻照中心)。
　　 5、細(xì)胞活力測(cè)定：用CCK-8法和克隆形成法檢測(cè)不同處理組細(xì)胞的存活率。CCK-8法公式：細(xì)胞存活率(％)=(藥物組OD值-本底/對(duì)照組OD值-本底)×100％；克隆形成法公式：克隆形成率(％)=(克隆數(shù)/接種細(xì)胞數(shù))/(貼壁存活細(xì)胞/接種細(xì)胞數(shù))
　　 6、細(xì)胞凋亡分析：流式細(xì)胞儀檢測(cè)由輻射因引起

10、的細(xì)胞凋亡百分率的變化，Annexin V-FITC/PI雙染。
　　 7、斑馬魚(yú)胚胎存活率測(cè)定：對(duì)不同劑量照射后斑馬魚(yú)胚胎的死亡率和一定照射劑量下孵化率、畸形率進(jìn)行檢測(cè)，并觀察各實(shí)驗(yàn)組不同時(shí)期胚胎發(fā)育表型變化。
　　 8、組織病理學(xué)變化：H&E染色法測(cè)定不同處理組成年斑馬魚(yú)胃腸道、肝臟和腎臟的形態(tài)變化。
　　 9、細(xì)胞DNA檢測(cè)：用γH2AX焦點(diǎn)形成法檢測(cè)由輻射引發(fā)的DNA雙鏈斷裂和后續(xù)修復(fù)。奧林巴斯BX51熒

11、光顯微鏡測(cè)定焦點(diǎn)形成的圖像，用image proplus軟件計(jì)數(shù)單個(gè)細(xì)胞內(nèi)焦點(diǎn)數(shù)量。所得圖象在相同設(shè)置下對(duì)焦點(diǎn)個(gè)數(shù)進(jìn)行分析，并用Spss13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行差異顯著性的分析并繪圖。
　　 10、測(cè)定羥自由基(·OH)：用HPF熒光探針檢測(cè)芒果苷苷元和芒果苷清除輻解水產(chǎn)生的羥自由基。
　　 11、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以(x-)±sd表示，單組間比較采用t檢驗(yàn)；多組間比較采用方差分析(ANOVA)，p<0.05為具有統(tǒng)計(jì)

12、學(xué)差異。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　 1、芒果苷及其衍生物輻射防護(hù)活性篩選
　　 1.1.芒果苷衍生物輻射防護(hù)活性篩選化合物濃度選擇：HIEC細(xì)胞隨照后孵育時(shí)間延長(zhǎng)(24、48、72h)存活率降低，照前給予不同濃度的芒果苷可提高細(xì)胞存活率。照后48h和72h檢測(cè)細(xì)胞活力，均顯示芒果苷濃度在70μg/mL時(shí)有較好的輻射防護(hù)效果，與單純照射組相比，有顯著差異(P<0.01)。25個(gè)衍生物有不同程度的防護(hù)作用。
　　

13、 1.2.芒果苷衍生物輻射防護(hù)活性篩選輻射劑量選擇：隨著照射劑量的增大(4、8、12、16Gy)，單純受照的HIEC細(xì)胞存活率均出現(xiàn)一定程度的降低，輻射劑量為8Gy時(shí)，細(xì)胞存活率僅為33.03±0.036％。照前與芒果苷共同孵育，可顯著提高HIEC細(xì)胞存活率，與單純照射組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)，此防護(hù)效果在時(shí)最為顯著。
　　 1.3.芒果苷衍生物對(duì)HIEC細(xì)胞的輻射防護(hù)效果：所有芒果苷衍生物均可不同程度的提高照后H

14、IEC細(xì)胞的存活率，提前給予芒果苷、苷元以及10號(hào)化合物后照射，檢測(cè)細(xì)胞存活率分別為：73.2±0.044％，78.3±0.029％，83.8±0.047％，與單純照射組相比顯著提高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　 1.4.芒果苷衍生物對(duì)3T3細(xì)胞的輻射防護(hù)效果：幾乎所有芒果苷衍生物均可不同程度的提高照后3T3細(xì)胞的存活率。單純照射3T3細(xì)胞存活率僅為40.66±0.024％，照射給予芒果苷、苷元以及21號(hào)化合物后照射，

15、檢測(cè)細(xì)胞存活率分別為：61.6±0.038％，69.4±0.042％，64.47±0.038％，與單純照射組相比顯著提高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　 2、芒果苷苷元對(duì)人腸上皮細(xì)胞的輻射生物學(xué)效應(yīng)
　　 2.1.不同濃度的芒果苷苷元照射后HIEC細(xì)胞存活率的影響：輻射防護(hù)效果隨藥物濃度的增大逐漸增加，芒果苷苷元濃度為70μg/mL時(shí)，防護(hù)作用最為顯著(P<0.01)。HEIC細(xì)胞在4、8、12、16Gy的照射劑

16、量下，芒果苷苷元組存活分?jǐn)?shù)是各單純照射組的1.52-，2.37-，2.41-，2.4-倍；芒果苷則為1.42-，2.22-，1.99-，1.87-倍。芒果苷苷元和芒果苷均可提高HIEC細(xì)胞照后的存活率，有較為顯著(P<0.05)的防護(hù)效果，且芒果苷苷元較芒果苷作用明顯。
　　 2.2.不同濃度的芒果苷苷元對(duì)照射后HIEC細(xì)胞克隆形成率的影響：平板克隆實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，照射前1.5h將細(xì)胞與10、20、50、70、100μg/mL的芒

17、果苷苷元共同孵育，存活分?jǐn)?shù)(SF)分別為54.4±0.061％、69.9±0.046％、81.4±0.033％、89.3±0.037％、86.3±0.060％，與單純照射(40.8±0.043％)組相比明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；芒果苷防護(hù)效果與苷元類(lèi)似。
　　 HEIC細(xì)胞在8、12、16Gy的照射劑量下，芒果苷苷元組存活分?jǐn)?shù)是各單純照射組的3.12-，3.91-，4.79-倍；芒果苷為2.04-，2.35-，

18、2.63-倍。用GraphPadPrism 5.0軟件單靶多擊或多靶單擊模型擬合劑量.存活曲線(xiàn)，分別求得相應(yīng)的劑量降低系數(shù)(DRF)：芒果苷苷元為1.833；芒果苷為1.52。以上結(jié)果提示，照射前給予芒果苷苷元或芒果苷共同孵育，可使HIEC細(xì)胞的體外增殖能力明顯提高。
　　 2.3.一定濃度芒果苷苷元對(duì)照射后HIEC細(xì)胞凋亡率的影響：流式細(xì)胞儀統(tǒng)計(jì)處理各組細(xì)胞的早期凋亡率，單獨(dú)給予芒果苷苷元或芒果苷處理的細(xì)胞早期凋亡率分別為：2

19、.6％和3.24％，與空白對(duì)照組(2.72％)相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。因此，單純給予芒果苷苷元或芒果苷不會(huì)引起細(xì)胞凋亡的改變。4Gy單純照射組的早期凋亡率為21.42％，給予芒果苷苷元組凋亡率為7.54％，給予芒果苷組凋亡率為9.35％。照射前給予HIEC細(xì)胞芒果苷苷元或芒果苷，可顯著減輕細(xì)胞凋亡率，與單純照射組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 3、芒果苷苷元對(duì)斑馬魚(yú)的輻射防護(hù)效應(yīng)
　　 3

20、.1.對(duì)不同輻射劑量下不同發(fā)育時(shí)期斑馬魚(yú)胚胎存活率的影響：隨著照射劑量的增加(10Cy、20Gy、30Gy)，胚胎存活率降低，具有一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系。顯微注射法給斑馬魚(yú)胚胎注射一定濃度的芒果苷苷元或芒果苷，作用一段時(shí)間后給予30Gy的γ射線(xiàn)照射。結(jié)果顯示：芒果苷苷元和芒果苷可以減輕γ射線(xiàn)對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的致死作用。與單純照射組相比，照射前給予芒果苷苷元和芒果苷可顯著(P<0.05)提高斑馬魚(yú)胚胎的存活率。
　　 3.2.對(duì)一定輻射

21、劑量下斑馬魚(yú)胚胎孵化率和畸變率的影響：與單純照絹相比，以芒果苷苷元組照射后的孵化率上升最明顯(P<0.05)。γ射線(xiàn)照射原腸期胚胎，可造成成年斑馬魚(yú)的畸型，芒果苷苷元組畸形發(fā)生率比單純照射組明顯減少；本實(shí)驗(yàn)中僅給予芒果苷苷元或芒果苷70μg/mL的胚胎孵化率下降并不明顯，但與空白對(duì)照組相比較，各組幼魚(yú)都出現(xiàn)一定的發(fā)育延遲現(xiàn)象。
　　 3.3.對(duì)一定輻射劑量下斑馬魚(yú)組織器官形態(tài)的影響：
　　 ①腸道：?jiǎn)渭冋丈浣M斑馬魚(yú)切片H

22、&E染色顯示，可看到小腸上皮細(xì)胞排列不規(guī)則，伴有不同程度的變性脫落，紋狀緣消失，部分斑馬魚(yú)腸管粘膜杯狀上皮細(xì)胞增生。照射前飼喂芒果苷苷元或芒果苷組小腸病理變化都比單純照射組輕，特別是小腸隱窩仍保持原有形態(tài)，隱窩上皮細(xì)胞數(shù)量恢復(fù)。
　　 ②肝臟：經(jīng)30Gy的γ射線(xiàn)照射后，斑馬魚(yú)的部分肝細(xì)胞出現(xiàn)腫脹，可見(jiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，胞漿內(nèi)出現(xiàn)小泡性脂滴。嚴(yán)重時(shí)，表現(xiàn)為細(xì)胞核固縮、細(xì)胞破裂和溶解，細(xì)胞功能發(fā)生衰退和壞死。照射前飼喂芒果苷苷元和芒

23、果苷，均可減輕輻射對(duì)斑馬魚(yú)肝臟的損傷。
　　 ③腎臟：對(duì)照組斑馬魚(yú)腎臟結(jié)構(gòu)完整，腎小球、腎小管清晰可見(jiàn)。經(jīng)30Gy的γ射線(xiàn)照射后，斑馬魚(yú)腎小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)腫脹、細(xì)胞境界不清，部分斑馬魚(yú)腎小管上皮細(xì)胞空泡樣變和脂滴，腎間質(zhì)瘀血并可見(jiàn)灶性炎細(xì)胞浸潤(rùn)。照射前飼喂芒果苷苷元和芒果苷，均可減輕輻射對(duì)斑馬魚(yú)腎臟的損傷。
　　 4、芒果苷類(lèi)化合物輻射防護(hù)作用機(jī)制探討
　　 4.1.芒果苷苷元清除羥自由基(·OH)的能力：?jiǎn)渭冋?/p>

24、射組可以觀察到很強(qiáng)的HPF熒光，而在照射前于體系中加入2μg/mL芒果苷苷元即可使HPF熒光明顯減弱。定量分析時(shí)發(fā)現(xiàn)，與單純照射組相比，不同濃度的芒果苷苷元或芒果苷·OH含量均有明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)義(P<0.05)；而且隨藥物濃度增加(1～10μg/mL)，·OH含量逐漸下降，呈一定的劑量-反應(yīng)關(guān)系。芒果苷苷元濃度為7μ/mL時(shí)，·OH含量下降最為明顯，芒果苷各濃度下降與苷元類(lèi)似，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　

25、4.2.芒果苷苷元對(duì)輻射引起的DNA雙鏈斷裂的影響：免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，人腸上皮細(xì)胞照射后0.5h的γH2AX焦點(diǎn)(foci)個(gè)數(shù)隨吸收劑量的增加(0～4Gy)而明顯增多，呈一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系。一定劑量照射前給予細(xì)胞芒果苷苷元70μg/mL共同孵育，單個(gè)細(xì)胞內(nèi)foci數(shù)目明顯減少，與單純照射1、2、4Gy組相比，分別減少41.3％、46.8％和43.4％，芒果苷組分別減少36.2％、40％和37.5％。僅給予HIEC芒果苷苷元或芒果

26、苷孵育，并未改變細(xì)胞核內(nèi)DSBs的數(shù)目，與空白對(duì)照組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。于照射后不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)foci形成，照后0.5h～2h內(nèi)foci數(shù)目達(dá)峰值后迅速下降，在此時(shí)間段內(nèi)，芒果苷苷元組和芒果苷組的foci數(shù)目明顯減少；而照后4～8h，給藥組的foci數(shù)目與單純照射組相似，無(wú)明顯差異(P>0.05)。
　　 討論分析：
　　 輻射損傷防治一直是生物學(xué)與醫(yī)學(xué)面臨的難題，世界很多國(guó)家已投入巨資開(kāi)展輻射防護(hù)藥物的

27、研究。但迄今為止，僅一種輻射防護(hù)藥物，即WR2721被美國(guó)FBA批準(zhǔn)進(jìn)入臨床，作為預(yù)防性保護(hù)措施在放療中應(yīng)用，但是其毒副作用較大，作為預(yù)防用藥很難被普通民眾接受。因此，尋求新的輻射防護(hù)劑以應(yīng)用于臨床放療或防治電離輻射損傷具有重要意義。輻射造成機(jī)體的損傷是通過(guò)直接作用和間接作用兩種基本方式實(shí)現(xiàn)的，又以間接作用起著主要作用，也是輻射防護(hù)研究的重點(diǎn)。在輻射產(chǎn)生的間接作用中，輻射誘導(dǎo)的自由基又是最主要的關(guān)鍵因素，它們引發(fā)包括氧化損傷在內(nèi)的一系列

28、生物化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞功能改變和結(jié)構(gòu)破壞。所以清除輻射產(chǎn)生的自由基，削弱輻射的間接作用，達(dá)到減輕機(jī)體輻射損傷的目的，是輻射防護(hù)研究最常見(jiàn)的、且被眾多實(shí)驗(yàn)證明是行之有效的切入途徑。
　　 芒果苷結(jié)構(gòu)中的酚羥基和芳香共軛基團(tuán)的存在，使得它具有很好的清除羥自由基的能力；另外，它還可以減輕自由基引發(fā)的細(xì)胞死亡，抑制線(xiàn)粒體功能異常的發(fā)生，修復(fù)SOD酶的活性。芒果苷的抗氧化能力提示它可能具有很好的輻射防護(hù)效果，本課題研究證實(shí)了芒果苷的輻射防

29、護(hù)作用。然而，芒果苷本身難溶于水，這很大程度上影響了它在輻射防護(hù)中的應(yīng)用發(fā)展。通過(guò)對(duì)芒果苷母體結(jié)構(gòu)的化學(xué)修飾，合成一系列新的衍生物，有可能解決芒果苷難溶于水的問(wèn)題，而且還可能得到抗氧化能力更好的化合物。本課題在細(xì)胞水平上對(duì)不同芒果苷衍生物的防護(hù)作用進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，在被篩選的25個(gè)芒果苷衍生物中，許多衍生物均有不同程度的防護(hù)作用，其中芒果苷苷元的輻射防護(hù)效果最佳。利用斑馬魚(yú)作為整體動(dòng)物模型進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，芒果苷苷元可以顯著減輕γ射線(xiàn)對(duì)

30、斑馬魚(yú)胚胎的致死作用，胚胎發(fā)育為成年時(shí)的畸形發(fā)生率比單純照射組明顯減少，孵化率明顯上升；成年斑馬魚(yú)照射前應(yīng)用芒果苷苷元后，腸道、肝臟和腎臟組織器官形態(tài)的輻射損傷顯著減輕。這些結(jié)果充分表明，芒果苷苷元不僅保留了芒果苷具有輻射防護(hù)作用的活性，而且對(duì)細(xì)胞和整體動(dòng)物的保護(hù)作用更全面。更重要的是，芒果苷苷元由于自身分子較小，具有較好的水溶性，更有研究發(fā)展前景。
　　 芒果苷苷元的輻射防護(hù)作用，與其清除羥自由基(·OH)和保護(hù)DAN有關(guān)。本

31、研究表明，在1～10μg/mL濃度范圍內(nèi)，隨著芒果苷苷元藥物濃度的增加，體系中·OH含量逐漸下降，呈一定的劑量-反應(yīng)關(guān)系，以芒果苷苷元濃度為7μg/mL時(shí)·OH含量下降最為明顯。研究還表明，芒果苷苷元能減輕輻射引起的DNA雙鏈斷裂，一定劑量照射前給予人腸上皮細(xì)胞芒果苷苷元70μg/mL共同孵育，單個(gè)細(xì)胞內(nèi)反映DNA雙鏈斷裂(DBS)情況的γH2AXfoci數(shù)目明顯減少，與單純照射1、2、4Gy組相比，分別減少41.3％、46.8％和43

32、.4％。本實(shí)驗(yàn)還顯示，芒果苷也具有清除·OH和減少受照細(xì)胞γH2AXfoci的活性，但作用程度略弱于芒果苷苷元。眾所周知，·OH是電離輻射誘導(dǎo)的對(duì)機(jī)體危害最大的自由基之一，而DNA分子則對(duì)電離輻射最敏感的生物大分子，DNA在電離輻射作用下形成的DBS，往往是細(xì)胞死亡或修復(fù)障礙的關(guān)鍵事件。我們認(rèn)為，芒果苷苷元的輻射防護(hù)作用，在較大程度上是通過(guò)其清除·OH和減少DNA雙鏈斷裂途徑實(shí)現(xiàn)的。
　　 綜上所述，本課題重點(diǎn)圍繞芒果苷苷元的輻