山羊傳染性胸膜肺炎病原的分離鑒定.pdf

1、本研究從四川地區(qū)某羊場(chǎng)具有傳染性胸膜肺炎臨床癥狀的患病山羊的肺臟、氣管等材料中成功地分離和鑒定了兩株霉形體(分別命名為Y1和Y2)。主要通過(guò)病原分離培養(yǎng)特性、形態(tài)學(xué)觀察、生化試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)、生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)和代謝抑制試驗(yàn)、動(dòng)物回歸試驗(yàn)等方法進(jìn)行鑒定。 鑒定結(jié)果如下：分離株Y1和Y2都能通過(guò)0.45μm的微孔濾器，進(jìn)行過(guò)濾傳代培養(yǎng)。在形態(tài)學(xué)觀察中，都具有革蘭氏染色不易著色，瑞氏染色良好呈淡紫色；在透射電鏡下觀察，Y1和Y2的菌體呈

2、球狀、絲狀、桿狀、螺旋狀等不規(guī)則形態(tài)，大小為0.2～0.4μm。在含1％營(yíng)養(yǎng)瓊脂的固體培養(yǎng)基上均形成圓形、露滴狀的小菌落；在40倍和100倍光學(xué)顯微鏡下觀察時(shí)，可看見(jiàn)典型的煎蛋樣菌落，但其形態(tài)不完全相同。Y1的菌落形態(tài)較小，菌落生長(zhǎng)比較密集，融合菌落較多，中心臍向上突起；Y2的菌落形態(tài)較大，菌落較分散，無(wú)中心臍。在生化試驗(yàn)中，Y1和Y2均能夠發(fā)酵葡萄糖、還原美藍(lán)、液化血清；均不水解尿素、不水解精氨酸、膜斑形成試驗(yàn)呈陰性、磷酸酯酶活性呈陰

3、性。在間接血凝試驗(yàn)中，提純的Y1和Y2抗原均能與PG3和Y98標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清發(fā)生凝集反應(yīng)，均不與PG3和Y98的標(biāo)準(zhǔn)陰性血清發(fā)生凝集反應(yīng)。在生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)中，PG3和Y98標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清均能抑制Y1和Y2生長(zhǎng)，并形成大于2mm的抑制圈；PG3和Y98的標(biāo)準(zhǔn)陰性血清均不能抑制Y1和Y2生長(zhǎng)，不形成明顯的抑制圈。在代謝抑制試驗(yàn)中，加入的標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清濃度較高時(shí)(如1∶23、1∶24)，均能抑制Y1和Y2的生長(zhǎng)；當(dāng)加入的標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清濃度適中時(shí)(如1∶

4、25、1∶26、1∶27)，PG3的標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清能在一定程度上抑制Y1的生長(zhǎng)，Y98的標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清能在一定程度上抑制Y2的生長(zhǎng)；當(dāng)加入的標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清濃度較低時(shí)(如1∶28、1∶29)，均不抑制Y1和Y2的生長(zhǎng)。在動(dòng)物回歸試驗(yàn)中，均能成功復(fù)制出山羊傳染性胸膜肺炎的典型臨床癥狀和病理解剖變化。 試驗(yàn)表明，Y1和Y2的形態(tài)與培養(yǎng)特性、生化反應(yīng)特性和血清學(xué)特性分別與模式株絲狀霉形體山羊亞種PG3和綿羊肺炎霉形體Y98相接近；結(jié)果證實(shí)Y1