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1、第一部分:pCD-rbFGF重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在成骨細(xì)胞中的表達(dá). 目的:構(gòu)建堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor bFGF)真核表達(dá)質(zhì)粒,探討應(yīng)用bFGF基因治療骨科各種疾患的可能性.方法:將鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因于cDNA克隆至真核表達(dá)載體pCDNA<,3>中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pCD-rbFGF.應(yīng)用限制性內(nèi)切酶分析重組質(zhì)粒中是否插入有bFGF cDNA.通過(guò)Liofectin介導(dǎo)將pCD
2、- rbFGF轉(zhuǎn)染兔成骨細(xì)胞,免疫組化檢測(cè)兔成骨細(xì)胞中bFGF的表達(dá).第二部分:bFGF基因轉(zhuǎn)染促進(jìn)股骨頭壞死修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究.目的:為臨床治療股骨頭及其它骨缺血性壞死探索新方法.方法:將堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)真核表達(dá)質(zhì)粒pCD-rbFGF 200ug與膠原混合植入壞死的兔股骨頭內(nèi),術(shù)后2周、4周RT-PCR及免疫組化方法檢測(cè)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因于表達(dá)情況,術(shù)后2周與對(duì)照組比較股骨頭內(nèi)血管生長(zhǎng)情況,術(shù)后8周與對(duì)照組比較股骨頭內(nèi)
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