德宏州和重慶市HIV-1新近感染及耐藥性研究.pdf

1、目的：對(duì)用于HIV-1新近感染檢測的BED-CEIA方法的實(shí)驗(yàn)性能進(jìn)行評(píng)價(jià)；應(yīng)用BED-CEIA方法在德宏州和重慶市的HIV-1感染者中進(jìn)行檢測，估算高危人群的HIV-1發(fā)病率；對(duì)德宏州和重慶市檢出的新近感染者進(jìn)行基因型耐藥檢測和亞型的分析，研究上述兩地區(qū)新近感染者中HIV-1的分子流行病學(xué)情況及耐藥的流行情況：探討根據(jù)Trugene耐藥報(bào)告中沉默突變個(gè)數(shù)初步區(qū)分樣品亞型的可能性。 研究方法： 1、對(duì)在國家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)

2、室和重慶、德宏兩個(gè)HIV確證實(shí)驗(yàn)室使用BED-CEIA方法進(jìn)行新近感染檢測的59、35和18塊酶標(biāo)板中質(zhì)控品(NC、CAL、LPC和HPC)的OD和OD-n進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)三個(gè)實(shí)驗(yàn)室初篩和確證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性進(jìn)行比較，得出R<'2>值。使用同一血清盤，將11位不同實(shí)驗(yàn)人員的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與參比室實(shí)驗(yàn)員的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較，得出R<'2>值。 2、對(duì)德宏、重慶、新疆和廣東庫存的1400份已知感染時(shí)間1年以上的HIV-1長期感染樣品進(jìn)行BE

3、D-CEIA檢測，探討該方法的假陽性率及其影響因素。 3、對(duì)德宏州2005年和2006年所有新診斷的HIV-1陽性樣品進(jìn)行BED-CEIA檢測，估算不同人群的HIV-1發(fā)病率。 4、對(duì)重慶2006年MSM中檢出的103份HIV-1陽性樣品進(jìn)行BED-CEIA檢測并估算發(fā)病率。 5、使用Bayer Trugene HIV-1方法對(duì)德宏州和重慶市檢出的部分新近感染樣品進(jìn)行基因型耐藥檢測，同時(shí)使用Trugene、HIV

4、db和Geno2pheno三種方法進(jìn)行耐藥性判定。 6、使用系統(tǒng)進(jìn)化樹、HIVseq和Geno2pheno三種方法進(jìn)行亞型分析，并對(duì)三種方法的結(jié)果進(jìn)行比較。 7、對(duì)樣品的亞型與Trugene耐藥報(bào)告中沉默突變的個(gè)數(shù)之間的關(guān)系進(jìn)行探討。 8、根據(jù)不同人群HIV-1感染率的不同，使用BED-CEIA發(fā)病率公式或者M(jìn)cDougal發(fā)病率計(jì)算校正公式估算HIV-1發(fā)病率。 9、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)

5、計(jì)分析。 結(jié)果： 1、三個(gè)實(shí)驗(yàn)室的OD和OD-n的CV值都比較低，OD-n的CV值均在12％以內(nèi)：三個(gè)實(shí)驗(yàn)室的初篩和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性高，其R<'2>均大于0.90；實(shí)驗(yàn)結(jié)果在12名不同操作者之間的可重復(fù)性強(qiáng)，R<'2>=0.9777。 2、通過使用BED-CEIA檢測1400份感染時(shí)間1年以上的長期感染樣品，得到適合中國的發(fā)病率計(jì)算校正系數(shù)，即采用γ=0.9348(ε=0.0652)計(jì)算HIV-1發(fā)病率。

6、 3、BED-CEIA檢測接受ART的HIV-1長期感染樣品和CD4≤50個(gè)/μl的未接受ART的HIV-1長期感染者樣品時(shí)，錯(cuò)分率較高；在HIV-1長期感染者中，錯(cuò)分率與年齡、性別以及接受ART的時(shí)間無關(guān)，但在接受ART的感染者中，漢族高于少數(shù)民族(P<0.05)。 4、BED-CEIA估算的重慶市MSM的HIV-1發(fā)病率為7.27(95％CI，4.79-9.75)。 5、在德宏州2005年和2006年，BED-C

7、EIA估算的IDU的HIV-1發(fā)病率分別為6.01(95％CI，3.78-8.23)和，8.74(95％CI，5.71-11.77)(P>0.05)；暗娼為0：69(95~CI，0-2.04)和1.39(95％CI，0-3.31)(P>0.05)；孕產(chǎn)婦為0.17(95％CI，0.08-0.27)和0.12(95％CI，0.06-0.19)(P>0.05)。2006年婚檢人群的發(fā)病率為0.13(95％CI，0.02-0.24)。

8、 6、德宏州(N=64)和重慶市(N=22)HIV-1新近感染者中的耐藥流行率分別為6.25％和4.55％。三種耐藥判定方法Trugene、HIVdb和Gen02pheno的結(jié)果存在差異。 7、重慶MSM新近感染者中以CRF07_BC為主，占77.27％(17/22);德宏州HIV-1新近感染者中的亞型有CRF07_BC/CRF08_BC、C、B和CRF01_AE，C/RF07_BC/CRF08_BC占65.63％(42164)

9、。與HIVseq相比，Gen02pheno的分型正確率較高。 8、HIV-1新近感染者中CRF07_BC、CRFOS_BC、C以及CRF01_AE等非B亞型(N=75)樣品的沉默突變的個(gè)數(shù)明顯要比B亞型(N=13)多，分別為63.8(95％CI，37.7-89.9)和31.2(95％CI，7.2-55.1)。 結(jié)論： 1、BED-CEIA方法具有較高的檢測性能，穩(wěn)定性和重復(fù)性均比較高。 2、得到適合中國的

10、BED-CEIA發(fā)病率計(jì)算公式校正系數(shù)。 3、應(yīng)用BED-CEIA方法時(shí)，應(yīng)盡可能排除接受ART的HIV-1長期感染樣品和CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)≤50個(gè)/μl的樣品。 4、重慶市MSM的感染率和發(fā)病率均處在較高的水平，需繼續(xù)加大監(jiān)測力度和干預(yù)力度。 5、德宏州IDU人群的HIV-1感染率和發(fā)病率保持在一個(gè)較高的水平上，應(yīng)繼續(xù)監(jiān)測該地區(qū)高危人群的發(fā)病率變化趨勢(shì)。 6、我國HIV-1新近感染人群的耐藥流行率仍