肌醇六磷酸對結(jié)直腸癌大鼠腫瘤轉(zhuǎn)移過程中EMT和MMPs的影響.pdf

1、目的：通過建立二甲肼（DMH）誘導(dǎo)的結(jié)直腸癌大鼠模型，研究不同濃度的肌醇六磷酸（Inositol hexaphosphate，IP6）對結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展及其轉(zhuǎn)移的抑制作用。探討IP6對結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移過程中的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）以及基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的作用機(jī)制。
　　方法：將60只雄性Wistar大鼠按體重隨機(jī)分為五組，每組12只，分別為：對照組(CG)、模型組(DG)、IP6低劑量組(LG)、IP6中劑量組(MG)、IP6

2、高劑量組(HG)。每日以0.25g/kg、0.5g/kg、1.0 g/kg不同劑量的植酸鈉對IP6低、中、高劑量組大鼠進(jìn)行灌胃，對照組和模型組以同體積的生理鹽水灌胃。喂養(yǎng)一個(gè)月后，模型組及IP6低、中、高劑量組大鼠，每周一次頸背部皮下注射30mg/kg DMH，對照組注射生理鹽水，一共注射18周。后繼續(xù)喂養(yǎng)16周直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。HE染色方法觀察組織病理學(xué)形態(tài)。實(shí)時(shí)定量 PCR方法檢測 E-鈣黏蛋白（E-cadherin）、轉(zhuǎn)化生長因子β（

3、TGF-β）、血管生成因子（VEGF）、基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子（MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2）mRNA的表達(dá)。Western-blot方法檢測E-cadherin、TGF-β、VEGF、MMP-9的蛋白水平表達(dá)。
　　結(jié)果：對照組、模型組及IP6低、中、高劑量組腫瘤發(fā)生率為：0%、100%、100%、88.9%、66.7%，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為：0%、62.5%、40%、25%、16.67%。共發(fā)現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移3例：

4、模型組2例，IP6低劑量1例；隨IP6劑量的增高E-cadherin mRNA與蛋白的表達(dá)量升高，與其他組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；隨IP6劑量的增高TGF-β、VEGF mRNA表達(dá)下降（P＜0.05），與模型組相比，IP6低中高各組TGF-β表達(dá)下降（P＜0.05），中高劑量組VEGF表達(dá)降低（P＜0.05），TGF-β、VEGF蛋白結(jié)果與 mRNA結(jié)果相似，IP6低中高各組VEGF的表達(dá)量與模型組相比下降均有差異（P＜

5、0.05）；隨IP6劑量的增高M(jìn)MP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的mRNA表達(dá)下降（P＜0.05），與模型組相比，IP6低中高各組TIMP-1表達(dá)下降（P＜0.05），IP6中高劑量組MMP-2、MMP-9與TIMP-2表達(dá)相繼下降（P＜0.05）；MMP-9蛋白結(jié)果與mRNA結(jié)果相似，IP6低中高各組 MMP-9的表達(dá)量與模型組相比下降均有差異（P＜0.05）。
　　結(jié)論：IP6對 DMH誘導(dǎo)的結(jié)直腸癌發(fā)生有抑制