兩類生殖激素在灘頭雅羅魚性腺發(fā)育周期中的作用研究.pdf

1、灘頭雅羅魚（Tribolodon brandti）隸屬于鯉科，雅羅魚亞科，三塊魚屬，是鯉科魚類中目前已知的唯一溯河洄游進行生殖產(chǎn)卵的魚類。本研究以灘頭雅羅魚為研究對象，運用組織學、生物學統(tǒng)計、酶聯(lián)免疫吸附測定、熒光定量等技術對灘頭雅羅魚在繁殖周期內(nèi)精巢和卵巢的組織學、血液中激素含量、相關基因表達變化進行了分析研究，結果如下：
　　1、采用組織切片技術對灘頭雅羅魚（Tribolodon brandti）性腺組織結構、在弱堿和淡水環(huán)境

2、下性腺發(fā)育情況、產(chǎn)卵時間及類型進行了研究。灘頭雅羅魚精巢應歸屬于小葉型精巢，按照精巢內(nèi)精細胞類型及形態(tài)共可分為6個發(fā)育時期。按照卵巢外形特征和生殖細胞類型，卵巢可分為6個發(fā)育期時期，對應卵細胞6個時相。研究表明，性成熟的灘頭雅羅魚在9月末性腺發(fā)育到第Ⅲ期，并以Ⅲ期越冬。而未達到性成熟的幼魚（2+齡）性腺發(fā)育到Ⅱ期，并以Ⅱ期越冬。性成熟的雄魚在4月末或5月初性腺發(fā)育到第Ⅴ期，雌魚在5月中下旬或6月初才能發(fā)育到第Ⅴ期，雄魚性腺發(fā)育快于雌魚。

3、2-3齡個體不論在淡水或弱堿水環(huán)境中養(yǎng)殖，性腺發(fā)育時相并無明顯區(qū)別。弱堿水2+群體體重顯著高于淡水同齡群體，然而3+群體在弱堿水和淡水中體重沒有顯著差異。同時，弱堿水和淡水中的同齡雌、雄之間體重變化存在差異。在性腺發(fā)育周期中，雌、雄的平均肥滿度在1.313-1.697之間波動。隨性周期變化，雄性從 II期開始性腺指數(shù)顯著上升；雌性性腺指數(shù)在不同發(fā)育時期都存在顯著差異，在V期最大為14.22。灘頭雅羅魚性腺發(fā)育高峰期一年只出現(xiàn)一次，為一次

4、性產(chǎn)卵類型。
　　2、在雌性灘頭雅羅魚中，隨著卵巢發(fā)育，血清中促卵泡激素（FSH）含量逐漸增加，并在性腺發(fā)育至Ⅳ期達到最大值，顯著高于其它各個時期，在Ⅴ期有一個微弱下降。然而，血清中促黃體激素（LH）含量在Ⅴ期達到最大值；促卵泡激素受體（FSHR）在卵巢發(fā)育周期中只出現(xiàn)一次高峰，F(xiàn)SHR表達量從Ⅱ到Ⅲ期增長緩慢，從Ⅲ到Ⅳ期增長迅速，并在第Ⅴ達到最大值。促黃體激素受體（LHR）的變化趨勢與FSHR相同，隨著卵巢的不斷發(fā)育，LHR表達

5、量逐漸上升，并在第Ⅴ期達到峰值。雄魚隨著精巢的不斷發(fā)育，血清中FSH含量逐漸增加，與雌性相似，Ⅳ期達到最大值，然后開始下降；血清中LH含量大體呈上升趨勢，精巢發(fā)育至Ⅲ期稍微下降，然后上升，在第Ⅴ期達到峰值；FSHR的表達量與其在雌性中相似。在Ⅱ和Ⅲ期FSHR表達量較低，在Ⅳ期增長迅速并達到最大值，然后在Ⅴ期有稍微的下降；LHR表達量在精巢的發(fā)育過程中從Ⅱ到Ⅳ期增長緩慢，在第Ⅴ期急劇增長并達到峰值，顯著高于其它各個時期。與雌性中不同，雄魚

6、精巢中只有在第Ⅴ期顯著高于其它各期。
　　3、雌性灘頭雅羅魚性腺發(fā)育過程中，血清中17β-雌二醇（E2）含量逐漸升高，并在Ⅳ期達到最大值，然后開始下降。在卵巢發(fā)育過程中血清睪酮（T）含量的變化模式與E2相似，在卵黃發(fā)生后期（Ⅳ期）達到最大值。卵巢發(fā)育過程中血清孕酮（P）含量在Ⅴ期（排卵期）達到最大值，表明 P可能在卵巢最后成熟過程中發(fā)揮重要作用；在雄性灘頭雅羅魚性腺發(fā)育過程中血清E2水平整體低于雌性，Ⅳ期達到峰值，然后在成熟期或排

7、精期略微下降。血清中 T含量隨著精巢的不斷發(fā)育而逐漸升高，并在第Ⅴ期達到峰值。精巢發(fā)育過程中血清中P的變化模式與E2相似，Ⅳ期達到最大值，然后在第Ⅴ期略微降低；雌激素β2受體（ERβ2）在卵巢發(fā)育前期（Ⅱ、Ⅲ期）在卵巢中的表達量較高，但是，隨著卵巢內(nèi)卵母細胞的逐漸成熟，ERβ2的表達量又變成下降趨勢，在第Ⅴ期卵巢中表達量降到最低。雄激素受體（AR）在雌雄性腺中的表達模式基本相同，均在Ⅳ期達到最大值，隨后開始下降。無論雌雄，孕酮受體（PG