針刺對(duì)大鼠慢性脊髓損傷神經(jīng)遞質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、慢性壓迫性脊髓損傷(Chronic compressive spinal cord injury, SCI)是中老年的常見(jiàn)多發(fā)疾病之一,多可導(dǎo)致病人截癱和四肢癱,使患者喪失勞動(dòng)和生活能力,已成為一個(gè)社會(huì)問(wèn)題。受損傷的脊髓神經(jīng)細(xì)胞能否再生修復(fù)脊髓功能,以及SCI的恢復(fù)機(jī)理,一直是倍受世界關(guān)注的熱點(diǎn)課題,也是國(guó)際脊髓信托基金會(huì)制定的 SCI的研究方向。
　　慢性SCI傳統(tǒng)的治療方法以手術(shù)解除壓迫為主,雖能明顯改善癥狀,但對(duì)于形成的繼發(fā)

2、損傷反應(yīng)屹今尚無(wú)滿意的療效。祖國(guó)醫(yī)學(xué),尤其是針刺在SCI的治療和研究方面做了大量的工作。長(zhǎng)期大量的臨床實(shí)踐證明,針刺對(duì)改善脊髓損傷后導(dǎo)致的感覺(jué)、運(yùn)動(dòng)以及括約肌功能障礙及其它合并癥,例如肌痙攣性疼痛、二便功能障礙和下肢癱瘓等都有毋庸置疑的療效,是治療SCI的重要手段。
　　但是,關(guān)于針刺治療脊髓損傷的機(jī)理的研究目前還處于萌芽階段。針刺治療慢性脊髓損傷減壓還缺乏相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)探索脊髓受壓后以及脊髓減壓和電針治療后運(yùn)動(dòng)神經(jīng)遞

3、質(zhì)乙酰膽堿的合成酶―膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(Choline acetyltransferase,ChAT)和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic,BDNF)及其受體 TrkC的變化規(guī)律,以及它們對(duì)脊髓功能的影響,以期明了脊髓減壓和電針治療慢性脊髓損傷的機(jī)理和本質(zhì)。
　　取60只2月齡Wistar大鼠,隨機(jī)分為對(duì)照組(即A組)10只;模型組50只。模型組造成中度壓迫(40％-50%)慢性脊髓損傷模型。兩個(gè)

4、月再隨機(jī)分為五組:B組,為持續(xù)壓迫組;C組,為減壓組;D組、E組、F組均為手術(shù)減壓后,進(jìn)行不同電流電針治療。應(yīng)用聯(lián)合行為評(píng)分(Combined behavioral score,CBS)評(píng)價(jià)脊髓神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能。三月后處死動(dòng)物,進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,免疫組織化學(xué)染色等方法檢測(cè)膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子及其受體TrkC基因表達(dá)的變化。
　　結(jié)果:(1)初次術(shù)后第60d攝X線側(cè)位片,證實(shí)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物椎管侵占率40%-50%(平均44.5%

5、)。CBS功能評(píng)分實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前所有動(dòng)物的神經(jīng)功能均為正常,60d時(shí)動(dòng)物模型組均可見(jiàn)功能障礙,B、C、D、E、F組CBS值增加,與A組比有明顯差異。90d時(shí)D組和F組動(dòng)物CBS評(píng)分變化不大,與C組CBS比較差異無(wú)顯著性,E組動(dòng)物CBS評(píng)分明顯減少,脊髓功能恢復(fù)好,功能評(píng)分優(yōu)于C組,CBS值比較差異具有顯著性。(2)ChAT免疫組織化學(xué)染色顯示,脊髓受壓后,B組ChAT陽(yáng)性染色神經(jīng)細(xì)胞數(shù)減少,染色強(qiáng)度減弱;減壓C組陽(yáng)性染色的神經(jīng)元較B組增多,

6、染色強(qiáng)度增加;E組陽(yáng)性染色的神經(jīng)元計(jì)數(shù)較減壓組增多更明顯,染色強(qiáng)度增加;E組與C組、D組、F組比較有顯著差異(P<0.05);ChAT陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)與CBS值呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.975,P=0.05)。(3)BDNF及TrkC免疫組化染色顯示,脊髓受到壓迫后,BDNF及TrkC在脊髓神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性染色增多;BDNF在壓迫嘴端前角細(xì)胞及空洞周圍的神經(jīng)元細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞均呈強(qiáng)陽(yáng)性染色;TrkC在壓迫尾端表達(dá)明顯增加;C組BDNF及Tr

7、kC在壓迫段神經(jīng)元細(xì)胞呈弱陽(yáng)性染色,且陽(yáng)性膠質(zhì)細(xì)胞減少;E組較C組、D組及F組在壓迫段神經(jīng)細(xì)胞及膠質(zhì)細(xì)胞BDNF及TrkC陽(yáng)性染色明顯減弱,陰性膠質(zhì)細(xì)胞亦明顯較少。
　　結(jié)論:(1)本實(shí)驗(yàn)采用脊髓后路漸進(jìn)性壓迫模型,可以模擬慢性壓迫性脊髓病(chronic compressive cervical myelopathy,CCM)發(fā)病的實(shí)際情況,說(shuō)明動(dòng)物模型是成功的。(2)脊髓受壓可以導(dǎo)致ChAT表達(dá)下降;BDNF和TrkC在壓迫節(jié)

8、段及壓迫嘴、尾端的神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)增強(qiáng)。(3)脊髓減壓和電針治療可以促進(jìn)ChAT陽(yáng)性染色細(xì)胞明顯增多,表達(dá)增強(qiáng);電針亦能促進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脊髓運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù);且 ChAT增多與神經(jīng)功能恢復(fù)有關(guān)。(4)電針治療可以促使 BDNF和TrkC陽(yáng)性染色的神經(jīng)元恢復(fù)弱陽(yáng)性表達(dá),這可能說(shuō)明BDNF及其受體介導(dǎo)了電針治療脊髓損傷的機(jī)制。(5)電針治療可能是通過(guò)促進(jìn)ChAT表達(dá)升高及活性增加,及影響B(tài)DNF及其受體的表達(dá)起治療作用,二者之間存在著相關(guān)關(guān)系,