近紅外光譜用于原料血漿醇沉過程中IgG含量快速檢測研究.pdf

1、血漿來源的人免疫球蛋白制品按注射途徑分為：肌肉注射人免疫球蛋白(Intramuscular Injection Immunoglobulin G，IMIG)和靜注人免疫球蛋白(Intravenous Immunoglobulin G，IVIG)，其中IVIG是以1000人份以上的健康人血漿為原料，用專門的分離純化技術(shù)制備的多克隆制品，其主要成分為IgG，此外，還包含少量的IgA、IgM等。
　　 從1990年至今，IVIG的臨床

2、應用己超過說明書標簽規(guī)定的適應癥(Off labeluse)范圍：治療原發(fā)性體液免疫缺陷、特發(fā)性血小板減少性紫癜和川崎綜合征；預防慢性淋巴細胞白血病或HIV感染兒童；防止新近接受同種異體骨髓移植的患者發(fā)生移植物抗宿主病、間質(zhì)性肺炎和感染；重癥肌無力、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等，此外IVIG的治療范圍也在不斷增加，如皮膚病、器官移植。
　　 由于血漿資源的緊缺和對IVIG臨床使用安全性要求的提高，如何提高IVIG產(chǎn)量、制品安全性和耐受性等方

3、面是研究熱點。目前國內(nèi)IVIG的制備主要是通過第二次世界大戰(zhàn)時美國科學家Cohn和Oncley等建立的低溫乙醇法，即從血漿及相關(guān)組分Ⅱ+Ⅲ或Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ中通過低溫乙醇分級沉淀，經(jīng)過純化得到人免疫球蛋白。但具實際生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)，生產(chǎn)過程中回收率低導致最終收率降低，這嚴重影響了血漿的綜合利用率。血漿資源寶貴，是血液制品生產(chǎn)過程的瓶頸，因此如何利用現(xiàn)有的資源，提高綜合利用率是解決目前血液制品供不應求的可行方法。因此，采用過程分析技術(shù)(process

4、 analytical technology，PAT)精準控制生產(chǎn)條件，對醇沉過程進行跟蹤分析以提高血漿綜合利用率，所選用的技術(shù)為近紅外光譜分析技術(shù)(near-infrared spectroscopy，NIRS)。
　　 NIRS是目前發(fā)展最快和最具有前景的過程分析技術(shù)之一，據(jù)文獻報道，NIRS能夠作為如混合、干燥、提取、結(jié)晶等制藥單元操作過程的有效的檢測手段。NIRS波長范圍為780-2526 nm，主要反映含氫基團O-H，

5、C-H，N-H的伸縮振動的倍頻吸收及伸縮振動和搖擺振動的合頻吸收，分析范圍幾乎可以覆蓋所有的有機化合物。其最大特點是操作簡便、分析速度快；非破壞性，樣品制備量??；可對液狀、顆粒狀、固體狀、糊狀、不透明的樣品進行分析；多組分同時測定；在線實時監(jiān)測。這些特點使得NIRS成為合適的在線過程控制分析儀。
　　 本實驗擬以原料血漿醇沉得到Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ步驟作為操作單元，采用NIRS分析醇沉過程上清液中IgG含量的變化，首先建立一種快速檢測醇沉

6、過程上清液中IgG含量方法，這也是提高血漿綜合利用率的關(guān)鍵部分。具體研究內(nèi)容如下：
　　 (1)采用不同預處理方法對光譜進行處理，包括無處理、一階導數(shù)、二階導數(shù)、SG平滑、一階導數(shù)+SG平滑，最終選擇一階導數(shù)+SG9點平滑作為最佳預處理方法；
　　 (2)考察相關(guān)系數(shù)法、iPLS法、CARS-PLS法三種波段選擇方法對光譜進行最優(yōu)波段的選擇。其中iPLS方法中所選擇區(qū)間5200-5800 cm-1，6400-7000 c