近紅外光譜分析技術(shù)應(yīng)用于人血白蛋白原液蛋白質(zhì)含量快速檢測(cè)的研究.pdf

1、人血白蛋白是從健康人血漿中提取，經(jīng)低溫乙醇法或經(jīng)批準(zhǔn)的其它分離法分離純化并經(jīng)60℃10小時(shí)滅活病毒后制成的無(wú)菌制品。其含適宜的穩(wěn)定劑，不含防腐劑和抗生素，專供靜脈輸注。它的主要成分是白蛋白，純度高達(dá)96.0％以上，是一種理想的臨床血容擴(kuò)張劑，且性能穩(wěn)定，便于保存、運(yùn)輸和臨床輸注使用。
　　近年來(lái)，原料血漿資源較為緊缺一直是企業(yè)發(fā)展的瓶頸，同時(shí)患者對(duì)人血白蛋白等血液制品的安全性要求也在逐步提高，如何進(jìn)一步提高人血白蛋白質(zhì)量和制品安全

2、性，進(jìn)一步降低產(chǎn)品污染的風(fēng)險(xiǎn)等是研究熱點(diǎn)。我公司生產(chǎn)過(guò)程中人血白蛋白原液蛋白含量的檢測(cè)方法采用凱氏定氮法，該方法檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)（約2-3小時(shí)），增加了人血白蛋白的污染的風(fēng)險(xiǎn)和生產(chǎn)周期?；诮t外光譜分析技術(shù)（Near-infrared Spectroscopy，NIRS）具有操作方便快捷（2-3分鐘）、對(duì)樣品無(wú)破壞性、無(wú)污染、而且可實(shí)現(xiàn)在線監(jiān)測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，本研究將NIRS應(yīng)用到人血白蛋白原液的蛋白含量的檢測(cè)中，以期望縮短檢測(cè)時(shí)間，降低人血白蛋

3、白的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。
　　首先，分析了用凱氏定氮法檢測(cè)人血白蛋白原液蛋白含量前后制品中的微生物負(fù)載及變化情況，評(píng)估此階段對(duì)人血白蛋白產(chǎn)品質(zhì)量可能存在的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。
　　然后，采用實(shí)驗(yàn)室型NIR研究。本研究建立了人血白蛋白原液蛋白含量的NIRS定量分析模型。模型的建立過(guò)程中，選擇一階導(dǎo)數(shù)、Savitzky-Golay卷積平滑（S-G平滑）和均值中心化(Mean Center)的最佳的預(yù)處理方法對(duì)光譜進(jìn)行預(yù)處理，然后采用Forward

4、iPLS變量選擇方法對(duì)變量區(qū)間進(jìn)行選擇，建立的最終模型結(jié)果評(píng)價(jià)參數(shù)校正集決定系數(shù)（Determination Coefficient of Calibration，Rc2）、驗(yàn)證集決定系數(shù)（Determination Coefficient of Validation，Rp2）、校正均方根誤差(Root Mean Squares Error of Calibration，RMSEC)、預(yù)測(cè)均方根誤差(Root MeanSquares E

5、rror of Prediction，RMSEP)、交互驗(yàn)證均方根誤差(Root Mean SquaresError of Cross-validation，RMSECV)值分別為0.997、0.987、0.1394％、0.2560％、0.1831％，并對(duì)模型的重復(fù)性進(jìn)行考察，結(jié)果顯示RSD值均在1.0％以下，顯示了模型的良好的預(yù)測(cè)精密度。
　　其次，考察便攜式應(yīng)用可行性。采用Micro NIR1700型近紅外光譜儀對(duì)用于人血白蛋

6、白原液蛋白含量的快速檢測(cè)進(jìn)行可行性分析。建立的模型結(jié)果參數(shù)Rc2、Rp2、RMSEC、RMSEP、RMSECV值分別為0.977、0.958、0.3983％、0.5334％、0.5653％，結(jié)果顯示通過(guò)建立的定量分析模型，Micro NIR1700型近紅外光譜儀也可以用于人血白蛋白原液蛋白含量的快速檢測(cè)。
　　最后，結(jié)合人血白蛋白生產(chǎn)工藝，對(duì)比近紅外光譜檢測(cè)法與半微量凱氏定氮法時(shí)間的差異，分析了NIRS檢測(cè)技術(shù)對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量和公司節(jié)能