近紅外光譜分析技術(shù)應(yīng)用于人血白蛋白原液蛋白質(zhì)含量快速檢測的研究.pdf

1、人血白蛋白是從健康人血漿中提取，經(jīng)低溫乙醇法或經(jīng)批準(zhǔn)的其它分離法分離純化并經(jīng)60℃10小時滅活病毒后制成的無菌制品。其含適宜的穩(wěn)定劑，不含防腐劑和抗生素，專供靜脈輸注。它的主要成分是白蛋白，純度高達(dá)96.0％以上，是一種理想的臨床血容擴(kuò)張劑，且性能穩(wěn)定，便于保存、運(yùn)輸和臨床輸注使用。
　　近年來，原料血漿資源較為緊缺一直是企業(yè)發(fā)展的瓶頸，同時患者對人血白蛋白等血液制品的安全性要求也在逐步提高，如何進(jìn)一步提高人血白蛋白質(zhì)量和制品安全

2、性，進(jìn)一步降低產(chǎn)品污染的風(fēng)險(xiǎn)等是研究熱點(diǎn)。我公司生產(chǎn)過程中人血白蛋白原液蛋白含量的檢測方法采用凱氏定氮法，該方法檢測時間較長（約2-3小時），增加了人血白蛋白的污染的風(fēng)險(xiǎn)和生產(chǎn)周期?；诮t外光譜分析技術(shù)（Near-infrared Spectroscopy，NIRS）具有操作方便快捷（2-3分鐘）、對樣品無破壞性、無污染、而且可實(shí)現(xiàn)在線監(jiān)測等優(yōu)點(diǎn)，本研究將NIRS應(yīng)用到人血白蛋白原液的蛋白含量的檢測中，以期望縮短檢測時間，降低人血白蛋

3、白的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。
　　首先，分析了用凱氏定氮法檢測人血白蛋白原液蛋白含量前后制品中的微生物負(fù)載及變化情況，評估此階段對人血白蛋白產(chǎn)品質(zhì)量可能存在的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。
　　然后，采用實(shí)驗(yàn)室型NIR研究。本研究建立了人血白蛋白原液蛋白含量的NIRS定量分析模型。模型的建立過程中，選擇一階導(dǎo)數(shù)、Savitzky-Golay卷積平滑（S-G平滑）和均值中心化(Mean Center)的最佳的預(yù)處理方法對光譜進(jìn)行預(yù)處理，然后采用Forward

4、iPLS變量選擇方法對變量區(qū)間進(jìn)行選擇，建立的最終模型結(jié)果評價參數(shù)校正集決定系數(shù)（Determination Coefficient of Calibration，Rc2）、驗(yàn)證集決定系數(shù)（Determination Coefficient of Validation，Rp2）、校正均方根誤差(Root Mean Squares Error of Calibration，RMSEC)、預(yù)測均方根誤差(Root MeanSquares E

5、rror of Prediction，RMSEP)、交互驗(yàn)證均方根誤差(Root Mean SquaresError of Cross-validation，RMSECV)值分別為0.997、0.987、0.1394％、0.2560％、0.1831％，并對模型的重復(fù)性進(jìn)行考察，結(jié)果顯示RSD值均在1.0％以下，顯示了模型的良好的預(yù)測精密度。
　　其次，考察便攜式應(yīng)用可行性。采用Micro NIR1700型近紅外光譜儀對用于人血白蛋

6、白原液蛋白含量的快速檢測進(jìn)行可行性分析。建立的模型結(jié)果參數(shù)Rc2、Rp2、RMSEC、RMSEP、RMSECV值分別為0.977、0.958、0.3983％、0.5334％、0.5653％，結(jié)果顯示通過建立的定量分析模型，Micro NIR1700型近紅外光譜儀也可以用于人血白蛋白原液蛋白含量的快速檢測。
　　最后，結(jié)合人血白蛋白生產(chǎn)工藝，對比近紅外光譜檢測法與半微量凱氏定氮法時間的差異，分析了NIRS檢測技術(shù)對產(chǎn)品質(zhì)量和公司節(jié)能