Ⅰ型干擾素在脂多糖所致樹突狀細(xì)胞免疫麻痹中的作用機制研究.pdf

1、樹突狀細(xì)胞是目前已知功能最強的抗原提呈細(xì)胞，然而在細(xì)菌性感染以及某些病理條件下，其介導(dǎo)的免疫反應(yīng)將會受到嚴(yán)重抑制，呈現(xiàn)免疫麻痹狀態(tài)。Ⅰ型干擾素是一種多功能的細(xì)胞因子，可能參與細(xì)菌性感染所致免疫麻痹過程，但其作用機制不甚明了。為此，我們以脂多糖(LPS)刺激樹突狀細(xì)胞(DCs)建立抗原交叉提呈免疫麻痹體系，對Ⅰ型干擾素(Ⅰ-IFN)在脂多糖所致樹突狀細(xì)胞免疫麻痹中的作用及所涉及細(xì)胞因子和細(xì)胞亞群功能轉(zhuǎn)化進行了探討。對小鼠骨髓來源的DCs給

2、予一定劑量的LPS刺激，聯(lián)合抗原負(fù)載(SIINFEKL)，檢測LPS刺激對BM-DCs胞飲及交叉提呈抗原能力的影響;繼而行體外混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)和體內(nèi)CTL誘生動物實驗，檢測DCs介導(dǎo)的OVA抗原肽特異性T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和CTL效應(yīng);在此基礎(chǔ)之上，通過IFN-β重組細(xì)胞因子以及IFN-β封閉抗體處理，探究IFN-β在此免疫麻痹中的可能作用及相關(guān)機制。
　　 結(jié)果顯示:第一，LPS（10ng/ml）刺激能顯著增強BM-DCs的胞飲

3、作用和抗原交叉提呈能力;第二，LPS刺激能明顯提高BM-DCs表面共刺激分子CD80、CD86、CD40、OX40L和4-1BBL的表達(dá)，并且此上調(diào)作用可能與PI3K、Akt、Erk1/2和p38信號相關(guān);第三，LPS刺激抑制DCs介導(dǎo)的T細(xì)胞增殖反應(yīng)和CTL的誘生;第四，IFN-β是介導(dǎo)LPS所致DCs免疫麻痹的重要細(xì)胞因子，并且可能通過上調(diào)DCs表面共抑制分子B7-H1(PD-L1)的表達(dá)，與T細(xì)胞表面PD-1結(jié)合，抑制T細(xì)胞增殖;

4、第五，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是介導(dǎo)LPS所致DCs免疫麻痹的重要細(xì)胞亞群，LPS刺激上調(diào)DCs表面GITRL，通過與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞表面受體GITR作用，促進后者的增殖和功能發(fā)揮，介導(dǎo)免疫麻痹。
　　 上述結(jié)果提示:細(xì)菌性成分LPS抑制DCs介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，引起免疫麻痹。IFN-β通過上調(diào)B7-H1表達(dá)介導(dǎo)此LPS所致免疫麻痹現(xiàn)象，同時CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞通過GITRL/GITR信號在此免疫麻痹中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，為臨床上針