川陜兩地腎陽虛證的免疫功能基因初探.pdf

1、背景：近年來，由于醫(yī)學模式的改變，尤其是人類結構基因組計劃的順利完成，以及功能基因組學的快速發(fā)展，為中醫(yī)證候的研究帶來了新的機遇，如何進行證的現(xiàn)代化研究是目前中西醫(yī)結合研究的熱點，但由于證的復雜性，故以高通量基因芯片技術為橋梁，可望整體地、系統(tǒng)地研究證的功能基因組，本文以兩批腎陽虛證初步探討其免疫功能基因組，雖然這還僅僅是人類功能基因組研究的冰山一角，但是對于解決目前證的研究中面臨的困惑具有一定的積極的意義。 目的：①研究腎陽虛

2、證的差異基因表達譜；②尋找與腎陽虛證相關的免疫功能基因組。 方法：①理論：在“證候為特定癥狀組合的一群功能基因的異常表達”的假說基礎上，我們以NCBI及GO數(shù)據(jù)庫為基礎、中醫(yī)辨證論治為指導思想、現(xiàn)代醫(yī)學模式為參照、按病證結合的方法，研究腎陽虛骨關節(jié)炎患者的基因表達譜，著重從現(xiàn)代免疫學的角度分析，尋找相關的免疫功能基因組，以研究免疫基因在腎陽虛證中的變化情況。②實驗：以40個量的腎陽虛量表，精選川陜兩地兩批共24人(各以8例骨關節(jié)

3、炎腎陽虛證患者，8人為正常對照組)，22000點的六張基因芯片(單體樣本4份，合體樣本2份)為研究對象，參照西醫(yī)病名及理化手段、轉錄組學的基因表達枝術、數(shù)學上的生物統(tǒng)計、生物信息學的信息挖掘等多學科結合，研究腎陽虛證的差異基因表達譜，尋找相關的免疫功能基因組。 結果：①系統(tǒng)地分析了16位腎陽虛患者的證候評分表以及正常對照組的腎陽虛證候表。 ②經(jīng)手工查找獲得66條在六張芯片中重復表達且達到差異倍數(shù)基因；經(jīng)進一步信息挖掘，有

4、61條可在網(wǎng)絡數(shù)據(jù)庫里被識別，即有61條已知功能的基因，占所有重復表達差異基因的92.42％。發(fā)現(xiàn)有22條基因與免疫相關，占已知功能基因的36.07％，說明腎陽虛證與免疫基因表達有著密切的關系。 ③在網(wǎng)絡基因數(shù)據(jù)庫里分析六張基因芯片的生物學功能和涉及的相關通路，尤其是T、B細胞受體信號通路(CD8分子編碼基因、IL-2基因等6個基因與之密切相關)、Toll樣受體信號通路、補體級聯(lián)反應通路免疫基因通路。 建立病證結合的基因

5、基礎，初步發(fā)現(xiàn)了免疫基因表達譜，并探討在腎陽虛證和骨關節(jié)炎患者中的變化情況。 討論 腎陽虛證與免疫功能基因的聯(lián)系無論從理論分析還是實證研究，腎陽虛證與機體免疫功能的衰退有密切關系。 應用基因芯片進行證的現(xiàn)代化研究的優(yōu)點是高通量、大規(guī)模、全面的研究基因表達的需要；是病證結合的需要；基因研究的方法可以提供臨床治療的途徑。 病證結合方法的應用病證結合的方法可以最好的發(fā)揮中西醫(yī)兩方面的優(yōu)點，克服不