利用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)分析蜘蛛抱蛋屬植物化學(xué)成分.pdf

1、蜘蛛抱蛋屬(Aspidistra)隸屬于百合科(Liliaceae)鈴蘭族(Convallariaceae)，該屬植物多分布于越南和我國(guó)云貴高原地帶。其中四川蜘蛛抱蛋(Aspidistra sichuanensis)資源豐富，根莖在民間作為藥材應(yīng)用，具有活血散瘀、消腫止痛、補(bǔ)虛止咳等作用。甾體皂苷是蜘蛛抱蛋屬植物中的主要活性成分，由于該屬植物中甾體皂苷母核變化較多，部分甾體皂苷含量低，使其植化研究變得復(fù)雜和困難，系統(tǒng)的研究報(bào)道較少。液相

2、色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS)具有專屬、快速、靈敏等優(yōu)點(diǎn)，是中藥復(fù)雜化學(xué)成分定性和定量分析的有力工具。本論文采用LC-MS技術(shù)對(duì)6種蜘蛛抱蛋屬植物特別是四川蜘蛛抱蛋中的化學(xué)成分進(jìn)行了研究。主要分為以下3個(gè)部分:
　　1.蜘蛛抱蛋屬植物化學(xué)成分分析。該部分進(jìn)行了蜘蛛抱蛋屬6種植物即四川蜘蛛抱蛋(Aspidistra sichuanensis)、卵葉蜘蛛抱蛋(Aspidistra typica)、叢生蜘蛛抱蛋(Aspidistra

3、caespitosa)、貴州蜘蛛抱蛋(Aspidistra guizhouensis)、荔波蜘蛛抱蛋(Aspidistra liboensis)和線葉蜘蛛抱蛋(Aspidistra linearifolia)的LC-MS指紋圖譜分析;并進(jìn)一步運(yùn)用Markerlynx軟件進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)處理，發(fā)現(xiàn)四川蜘蛛抱蛋與卵葉蜘蛛抱蛋化學(xué)成分相似，叢生蜘蛛抱蛋化學(xué)成分與其它幾種蜘蛛抱蛋的化學(xué)成分差異最大。
　　2.四川蜘蛛抱蛋根莖中甾體皂苷類成分的

4、鑒定。該部分在課題組前期對(duì)卵葉蜘蛛抱蛋化學(xué)成分分離鑒定的基礎(chǔ)上，總結(jié)了6種典型結(jié)構(gòu)甾體皂苷的質(zhì)譜裂解規(guī)律和色譜規(guī)律，如在正離子高能量下不同苷元類型具有不同的裂解碎片:雅莫皂苷元(yamogenin)415/271、253，新靜特諾皂苷元(neogentrogenin)429、411/297、279等;C25位R/S異構(gòu)同分異構(gòu)體化合物，在C18色譜柱上C25位R構(gòu)型化合物的保留稍強(qiáng)于C25位S構(gòu)型化合物。利用UPLC/Q-TOF MSE

5、技術(shù)并結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道，共鑒定了四川蜘蛛抱蛋中60個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)（苷元種類多達(dá)26種），包括34個(gè)可能的新化合物、15組同分異構(gòu)體（C25位R/S異構(gòu)5種、羥基不同位置異構(gòu)3種、糖基不同位置異構(gòu)3種、雙鍵不同位置異構(gòu)4種）。
　　3.四川蜘蛛抱蛋不同部位化學(xué)成分分析。該部分進(jìn)行了四川蜘蛛抱蛋根莖、須根和葉3個(gè)部位的LC-MS指紋圖譜分析;并進(jìn)一步運(yùn)用Markerlynx軟件進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)處理，發(fā)現(xiàn)須根和根莖部位的化學(xué)成分相似，而葉與根莖

6、部位的化學(xué)成分差異較大;并鑒定了葉中8個(gè)與根莖差異較大的化學(xué)成分和根莖中12個(gè)與葉差異較大的化學(xué)成分。同時(shí)利用OPLS_DA分析尋找根莖與須根部位中有差異的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，共鑒定了須根中2個(gè)化合物和根莖中5個(gè)化合物，作為目標(biāo)化合物進(jìn)行了POSI±IVE分析。發(fā)現(xiàn)根莖與須根部位化學(xué)成分整體種類相似，但部分化學(xué)成分含量有差別。此部分的研究提示可以考慮蜘蛛抱蛋須根與根莖一起作為藥用。
　　結(jié)論:本論文利用UPLC/Q-TOF MSE

7、技術(shù)，結(jié)合多元統(tǒng)計(jì)分析軟件，建立了中藥組成成分表征、差異性分析及其結(jié)構(gòu)快速鑒定的方法。以蜘蛛抱蛋屬6種植物為研究對(duì)象，利用UPLC/Q-TOF MS技術(shù)進(jìn)行了甾體皂苷組成的表征;根據(jù)甾體皂苷的質(zhì)譜裂解規(guī)律和色譜規(guī)律快速鑒定了四川蜘蛛抱蛋中一系列甾體皂苷化合物的結(jié)構(gòu)，包括新化合物及同分異構(gòu)體;利用Markerlynx軟件快速了解了不同種植物化學(xué)成分的異同，以及四川蜘蛛抱蛋植物須根、葉部位與根莖部位化學(xué)成分的異同，為四川蜘蛛抱蛋藥用部位的研