蒺藜TTS-12抗真菌活性研究及其凝膠劑的制劑研究.pdf

1、目的：測定蒺藜中TTS-12對四種常見致病性皮膚癬菌的體外抗真菌作用，制備蒺藜TTS-12凝膠劑及評價蒺藜TTS-12凝膠對豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型的影響，為蒺藜TTS-12凝膠申請醫(yī)院制劑提供依據(jù)。
　　方法：
　　1.運用微量液基稀釋法測定蒺藜TTS-12對四種常見致病性皮膚癬菌的MIC值及MFC值，評價蒺藜TTS-12的體外抗真菌活性。
　　2.通過HPLC-ELSD法測定蒺藜TTS-12在不同溶劑中的溶解度，

2、表觀油水分配系數(shù)及蒺藜TTS-12原料藥的穩(wěn)定性，為蒺藜TTS-12的處方設(shè)計提供依據(jù)。
　　3.通過正交試驗設(shè)計處方并以外觀及穩(wěn)定性為評價標準，篩選出外觀穩(wěn)定性合格的凝膠劑并通過體外釋放度進一步篩選出體外釋放效果較優(yōu)的凝膠劑。
　　4.構(gòu)建豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型，通過對蒺藜TTS-12凝膠給藥后的豚鼠進行背部病變程度評分、病灶皮膚真菌培養(yǎng)和觀察病灶皮膚病理變化，探討蒺藜TTS-12凝膠對豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型的影響

3、。
　　結(jié)果：
　　1.蒺藜TTS-12對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌標準菌株的MIC80值(μg/mL)分別為1、1、0.5、2；MFC值(μg/mL)分別為16、32、8、32；臨床分離菌株(共17株)MIC80值(μg/mL)分別為1、1.1487、1.5874、2；MFC值(μg/mL)分別為10.7672、13.9288、12.6992、22.6274。
　　2.建立的蒺藜TTS-12原

4、料藥HPLC-ELSD含量測定分析方法，簡便、準確可靠。蒺藜TTS-12原料藥在高溫高濕條件下含量變化＜5％，性質(zhì)穩(wěn)定；在不同溶劑中的溶解度隨著溶劑比例增大而增大，80%丙二醇溶解度為1.9975mg/mL，3%吐溫80溶解度為0.8788mg/mL，70%乙醇溶解度為4.6952mg/mL；蒺藜TTS-12的表觀油水分配系數(shù)為3.7，可知蒺藜TTS-12微溶于水，較易溶于脂。
　　3.通過正交試驗設(shè)計的9組凝膠中，1、2、3、4

5、、6號處方外觀及穩(wěn)定性合格，綜合評分均＞3，在體外釋放度試驗中，5組凝膠的體外釋放度大小為3＞6＞4＞1＞2，進一步篩選出釋放效果較好代表低、中、高劑量的3組處方用于對豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型的給藥。
　　4.在豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型中，除空白組外，與模型組相比，給藥組的背部病變程度評分都有不同程度的下降。在第4d，與模型組相比，低劑量組評分降低有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05），中、高劑量的蒺藜TTS-12凝膠組評分均有明顯地降

6、低（P＜0.01），在第8d，與模型組相比，低、中、高劑量的蒺藜TTS-12凝膠組和陽性對照組評分均有明顯地降低（P＜0.01）。各組病灶皮膚真菌培養(yǎng)陰性率分別為：空白組100%、模型組20.83%、陰性對照組25%、陽性對照組75%、低劑量組41.67%、中劑量組51.17%、高劑量組66.67%。病灶皮膚HE染色切片結(jié)果顯示低、中、高劑量組有一定程度的棘層肥厚，炎性細胞浸潤較模型組輕，其中高劑量組的角質(zhì)層正常，炎癥情況比較輕。

7、>　　結(jié)論：
　　1.微量液基稀釋法測定的結(jié)果表明，蒺藜TTS-12對紅色毛癬菌，須癬毛癬菌、犬小孢子菌、石膏樣小孢子的標準菌株及臨床分離菌株均具有較好的體外抗真菌活性。
　　2.蒺藜TTS-12原料藥在高溫高濕條件下含量變化小，便于凝膠的制備及存放。通過處方篩選出的凝膠顏色、涂布性等性狀均符合要求，體外釋放度試驗篩選的凝膠具有良好的釋放性能。
　　3.蒺藜TTS-12凝膠對豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型的病變情況有不同程