蒺藜TTS-12抗真菌活性研究及其凝膠劑的制劑研究.pdf

1、目的：測(cè)定蒺藜中TTS-12對(duì)四種常見(jiàn)致病性皮膚癬菌的體外抗真菌作用，制備蒺藜TTS-12凝膠劑及評(píng)價(jià)蒺藜TTS-12凝膠對(duì)豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型的影響，為蒺藜TTS-12凝膠申請(qǐng)醫(yī)院制劑提供依據(jù)。
　　方法：
　　1.運(yùn)用微量液基稀釋法測(cè)定蒺藜TTS-12對(duì)四種常見(jiàn)致病性皮膚癬菌的MIC值及MFC值，評(píng)價(jià)蒺藜TTS-12的體外抗真菌活性。
　　2.通過(guò)HPLC-ELSD法測(cè)定蒺藜TTS-12在不同溶劑中的溶解度，

2、表觀油水分配系數(shù)及蒺藜TTS-12原料藥的穩(wěn)定性，為蒺藜TTS-12的處方設(shè)計(jì)提供依據(jù)。
　　3.通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)處方并以外觀及穩(wěn)定性為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，篩選出外觀穩(wěn)定性合格的凝膠劑并通過(guò)體外釋放度進(jìn)一步篩選出體外釋放效果較優(yōu)的凝膠劑。
　　4.構(gòu)建豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型，通過(guò)對(duì)蒺藜TTS-12凝膠給藥后的豚鼠進(jìn)行背部病變程度評(píng)分、病灶皮膚真菌培養(yǎng)和觀察病灶皮膚病理變化，探討蒺藜TTS-12凝膠對(duì)豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型的影響

3、。
　　結(jié)果：
　　1.蒺藜TTS-12對(duì)紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC80值(μg/mL)分別為1、1、0.5、2；MFC值(μg/mL)分別為16、32、8、32；臨床分離菌株(共17株)MIC80值(μg/mL)分別為1、1.1487、1.5874、2；MFC值(μg/mL)分別為10.7672、13.9288、12.6992、22.6274。
　　2.建立的蒺藜TTS-12原

4、料藥HPLC-ELSD含量測(cè)定分析方法，簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確可靠。蒺藜TTS-12原料藥在高溫高濕條件下含量變化＜5％，性質(zhì)穩(wěn)定；在不同溶劑中的溶解度隨著溶劑比例增大而增大，80%丙二醇溶解度為1.9975mg/mL，3%吐溫80溶解度為0.8788mg/mL，70%乙醇溶解度為4.6952mg/mL；蒺藜TTS-12的表觀油水分配系數(shù)為3.7，可知蒺藜TTS-12微溶于水，較易溶于脂。
　　3.通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的9組凝膠中，1、2、3、4

5、、6號(hào)處方外觀及穩(wěn)定性合格，綜合評(píng)分均＞3，在體外釋放度試驗(yàn)中，5組凝膠的體外釋放度大小為3＞6＞4＞1＞2，進(jìn)一步篩選出釋放效果較好代表低、中、高劑量的3組處方用于對(duì)豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型的給藥。
　　4.在豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型中，除空白組外，與模型組相比，給藥組的背部病變程度評(píng)分都有不同程度的下降。在第4d，與模型組相比，低劑量組評(píng)分降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），中、高劑量的蒺藜TTS-12凝膠組評(píng)分均有明顯地降

6、低（P＜0.01），在第8d，與模型組相比，低、中、高劑量的蒺藜TTS-12凝膠組和陽(yáng)性對(duì)照組評(píng)分均有明顯地降低（P＜0.01）。各組病灶皮膚真菌培養(yǎng)陰性率分別為：空白組100%、模型組20.83%、陰性對(duì)照組25%、陽(yáng)性對(duì)照組75%、低劑量組41.67%、中劑量組51.17%、高劑量組66.67%。病灶皮膚HE染色切片結(jié)果顯示低、中、高劑量組有一定程度的棘層肥厚，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較模型組輕，其中高劑量組的角質(zhì)層正常，炎癥情況比較輕。

7、>　　結(jié)論：
　　1.微量液基稀釋法測(cè)定的結(jié)果表明，蒺藜TTS-12對(duì)紅色毛癬菌，須癬毛癬菌、犬小孢子菌、石膏樣小孢子的標(biāo)準(zhǔn)菌株及臨床分離菌株均具有較好的體外抗真菌活性。
　　2.蒺藜TTS-12原料藥在高溫高濕條件下含量變化小，便于凝膠的制備及存放。通過(guò)處方篩選出的凝膠顏色、涂布性等性狀均符合要求，體外釋放度試驗(yàn)篩選的凝膠具有良好的釋放性能。
　　3.蒺藜TTS-12凝膠對(duì)豚鼠感染須癬毛癬菌體癬模型的病變情況有不同程