膿毒癥患者外周血鞭毛蛋白含量及單個核細(xì)胞TLR5 mRNA表達(dá)的測定與意義.pdf

1、急性呼吸窘迫綜合征是膿毒癥的重要并發(fā)癥。一般認(rèn)為，脂多糖(LPS)釋放入血，在肺部引起播散性的炎癥反應(yīng)，最后導(dǎo)致肺泡及毛細(xì)血管膜的損傷。在革蘭氏陰性桿菌所致膿毒癥中，是否還有其他的細(xì)菌毒素在起作用呢? 近年研究表明，細(xì)菌鞭毛的主要成分鞭毛蛋白，在膿毒癥中，可通過Toll樣受體5(TLR5)引起急性炎癥反應(yīng)。本實驗在本研究所既往離體及動物實驗研究的基礎(chǔ)上，通過測定膿毒癥患者外周血鞭毛蛋白的含量及TLR5表達(dá)水平的變化，進(jìn)一步探討鞭

2、毛蛋白在膿毒癥并發(fā)急性肺損傷(ALI)中的作用及機(jī)制，為ALI的防治提供新的理論及實驗依據(jù)。 方法：按照1992年美國胸科醫(yī)師學(xué)會(ACCP)和危重病學(xué)會(SCCM)提出的膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)：感染+SIRS(≥2項)，選取經(jīng)檢驗科體液培養(yǎng)證實為G-桿菌所致膿毒癥患者(G-菌組)14例，G+球菌所致膿毒癥患者(G+菌組)8例，正常對照組為健康人9例。SIRS的診斷標(biāo)準(zhǔn)為：①體溫＞38.3℃或＜36℃；②心率＞90/min；③呼吸＞20

3、/min，PaCO2＜32mmHg；④WBC＞12×109/L或＜4.0×109/L或核左移＞10％。外周血鞭毛蛋白含量的檢測采用ELISA法。密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞，以BIOzol提取液提取外周血單個核細(xì)胞總RNA，用半定量RT-PCR法檢測外周血單個核細(xì)胞TLR5mRNA表達(dá)的變化，用t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計分析。 結(jié)果：G+菌組、正常對照組的外周血中未檢測到鞭毛蛋白，G-菌組的外周血鞭毛蛋白含量為6.636±5.147n