白藜蘆醇對人宮頸癌Hela細胞的凋亡、增殖及侵襲的研究.pdf

1、白藜蘆醇對人宮頸癌Hela細胞凋亡、增殖及侵襲的影響白藜蘆醇(Resveratrol,Res)是一種含有芪類結構的非黃酮類多酚化合物，廣泛分布在虎杖、葡萄、花生等植物中，具有多種生理及藥理活性。研究表明Res可具有抗炎、抗菌、抗氧化、抑制血小板聚集、降血脂等多種生物學功能。目前，Res被認為是一種很有潛力的腫瘤抑制劑，國內外在白血病、乳腺癌、肝癌、肺癌、大腸癌、卵巢癌等腫瘤中研究較多，但在宮頸癌中的研究少有報道。 目的：研究不同

2、濃度白藜蘆醇對人宮頸癌Hela細胞體外生長的影響，并初步探討其作用機制。 方法：用不同濃度的白藜蘆醇作用于人宮頸癌Hela細胞，通過MTT法來檢測白藜蘆醇對人宮頸癌Hela細胞增殖的影響；采用細胞形態(tài)學觀察及TdT 酶介導的dUTP缺口末端標記法(TUNEL試劑盒)檢測白藜蘆醇對Hela細胞凋亡的影響；通過體外侵襲實驗(transwell小室)檢測白藜蘆醇對Hela細胞侵襲能力的影響；通過Survivin，Caspase-3與β

3、-catenin等蛋白的細胞免疫組化檢測技術來初步探討白藜蘆醇對人宮頸癌Hela細胞的作用機制。 結果： 1、不同濃度白藜蘆醇濃度對Hela細胞均有抑制作用。 2、白藜蘆醇在25μmol/L-100μmol/L 范圍內呈時間和劑量依賴。在100μmol/L已達到作用濃度平臺期。 3、50/amol/L 及以上濃度的白藜蘆醇對Hela 細胞TUNEL實驗染色觀察，發(fā)現(xiàn)視野內Hela細胞有明顯的凋亡陽性反應。

4、隨時間延長凋亡率增加。 4、白藜蘆醇處理Hela 細胞后HE染色、吉姆薩染色法均以倒置顯微鏡觀察到細胞凋亡的典型形態(tài)學特征，且隨濃度增加凋亡細胞增加。 5、白藜蘆醇處理Hela 細胞經免疫組化SABC法檢測隨著作用時間的延長上調Caspase-3蛋白表達，下調Survivin蛋白表達。 6、通過體外侵襲實驗(transwell小室)得出，12.5μmol/L 濃度的白藜蘆醇對Hela細胞即有一定的抑制侵襲作用。

5、7、50μmol/L 白藜蘆醇處理Hela 細胞免疫組化SABC法檢測與對照組相比隨著作用時間的延長β-catenin 蛋白在細胞核及細胞漿核內表達減弱，細胞膜表達增強。 結論： 1、達到一定濃度的白藜蘆醇就能夠對人宮頸癌Hela 細胞產生明顯的抑制增殖作用，在一定濃度范圍內呈時間劑量依賴。本實驗中相對較低濃度的白藜蘆醇抑制作用隨時間的延長而漸漸明顯，較高濃度的白藜蘆醇12h之內就顯示出強烈的抑制增殖作用，但24h-48

6、h較12h-24h 增殖抑制率的增加程度的有所減少。 2、通過TUNEL檢測法及對Res處理的Hela 細胞形態(tài)的觀察學也證實白藜蘆醇在對Hela細胞在抑制其增殖的同時誘導其凋亡。Res對Hela細胞的凋亡作用很有可能是通過下調Survivin蛋白表達，上調Caspase-3 蛋白的表達來誘導人宮頸癌Hela細胞的凋亡，從而抑制腫瘤的生長。 3、本實驗中低濃度的白藜蘆醇即可抑制人宮頸癌Hela細胞的侵襲活性。其可能通過下