脫細(xì)胞血管支架的制備及構(gòu)建組織工程膽管的研究.pdf

1、肝外膽管損傷修復(fù)是目前臨床上肝膽外科面臨的難題之一，由于膽管缺乏肌層，所以其自我修復(fù)能力較差，其修復(fù)主要依靠纖維瘢痕組織增生完成。目前臨床治療方法有限，主要為膽管斷端吻合、球囊擴(kuò)張、膽管支架和膽腸吻合等，但是遠(yuǎn)期效果較差。另外，臨床上由于放棄了遠(yuǎn)端膽管 Oddi氏括約肌抗返流和調(diào)節(jié)膽汁排泄的功能，近遠(yuǎn)期有并發(fā)逆行性膽道感染、繼發(fā)性膽汁性肝硬化，甚至膽管癌的風(fēng)險(xiǎn)。因此，尋找一種結(jié)構(gòu)和功能與膽管相似的替代物是目前臨床亟待解決的問題。

2、　　本研究根據(jù)前期的血管脫細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果，利用陰離子去污劑十二烷基硫酸鈉和脫氧膽酸鈉去除兔子腹主動脈中所含細(xì)胞，使用核酸酶來清除基質(zhì)上殘留的DNA和RNA片段，降低其免疫原性，然后利用乙酸或木瓜蛋白酶在脫細(xì)胞血管基質(zhì)支架外表面造孔。通過組織學(xué)檢測，血管經(jīng)脫細(xì)胞處理前后，膠原纖維和彈性纖維結(jié)構(gòu)保持完整基本無斷裂，支架仍然具有良好的力學(xué)性能，無明顯的細(xì)胞殘留，只有較少DNA殘留（0.116±0.007μg/mg干重），不足以引起機(jī)體免疫排斥反

3、應(yīng)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，脂肪組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞能夠很好的在脫細(xì)胞血管基質(zhì)支架上生長、遷移和增殖，利用激光共聚焦掃描顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)清晰可辨，并可很好的長入該支架管壁。將該支架植入到巴馬香豬膽管損傷部位，術(shù)后45天取材發(fā)現(xiàn)該膽管管腔結(jié)構(gòu)明顯，腔內(nèi)有少量絮狀物淤積，管壁部分降解，但仍具有一定彈性。組織學(xué)H&E和Masson染色發(fā)現(xiàn)，該組織工程膽管管壁內(nèi)部均勻分布大量細(xì)胞，但管壁內(nèi)部無上皮狀細(xì)胞生成。
　　通過體內(nèi)外評價(jià)，本研究制備的