海楓藤抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的活性成分研究.pdf

1、目的：分離海楓藤藤莖中 C21甾體苷類化合物，以MTT法測定其對體外培養(yǎng)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細胞增殖的抑制作用，為進一步研究開發(fā)抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎新藥提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：1.化合物的提取分離海楓藤干燥藤莖用95％乙醇回流提取，提取物經(jīng)氯仿萃取，得到C21甾體總苷。經(jīng)硅膠柱層析和高效液相柱層析，分離化合物。
　　2.化合物的結(jié)構(gòu)鑒定通過IR、ESI-MS、HR-ESI-MS、13C-NMR、1H-NMR、DEPT、HMQC

2、、HMBC等現(xiàn)代波譜技術(shù)鑒定化合物結(jié)構(gòu)。
　　3.佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細胞體外培養(yǎng)試驗采用 MTT法測定藥物對體外培養(yǎng)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細胞增殖的抑制作用。
　　結(jié)果：1.從海楓藤的干燥藤莖中分離得到C21甾體總苷、流分Fr5、Fr9以及5個單體化合物：化合物Ⅰ、化合物Ⅱ、化合物Ⅲ、化合物Ⅳ和化合物Ⅴ。
　　2.化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的化學(xué)結(jié)構(gòu)：化合物Ⅰ為12-O-桂皮?；?20-O-乙?；?0S）-孕甾烷-6-烯-

3、3β,5α,8β,12β,14β,17β,20-庚醇3-O-甲基-6-去氧-β-D-阿洛吡喃糖基-（1→4）-β-D-夾竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖苷（12-O-cinnamoyl-20-O-acetyl（20S）-pregn-6-ene-3β,5α,8β,12β,14β,17β,20-heptanol3-O-methyl-6-deoxy-β-D-allopyranosyl-（1→4）-β-D-oleandropyran

4、osyl-（1→4）-β-D-cymaropyranoside），化合物Ⅱ為12-O-桂皮酰基-20-O-乙?；?0S）-孕甾烷-6-烯-3β,5α,8β,12β,14β,17β,20-庚醇3-O-β-D-黃夾吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖苷（12-O-cinnamoyl-20-O-acetyl（20S）-pregn-6-ene-3β,5α,8β,12β,14β,17β,20-heptano

5、l3-O-β-D-thevetopyranosyl-（1→4）-β-D-cymaropyranosyl-（1→4）-β-D-cymaropyranoside），化合物Ⅲ為12-O-煙?；?肉珊瑚苷元3-O-β-D-葡萄吡喃糖基-（1→4）-3-O-甲基-6-去氧-β-D-阿洛吡喃糖基-（1→4）-β-D-夾竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖苷（12-O-nicotinoylsarcostin3

6、-O-β-D-glucopyranosyl-（1→4）-3-O-methyl-6-deoxy-β-D-allopyranosyl-（1→4）-β-D-oleandropy-ranosyl-（1→4）-β-D-cymaropyranosyl-（1→4）-β-D-cymaropyranoside），化合物Ⅳ為12-O-桂皮?；?20-O-乙酰基（20S）-孕甾烷-6-烯-3β,5α,8β,12β,14β,17β,20-庚醇3-O-β-D-葡

7、萄吡喃糖基-（1→4）-3-O-甲基-6-去氧-β-D-阿洛吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖苷（12-O-cinnamoyl-20-O-acetyl（20S）-pregn-6-ene-3β,5α,8β,12β,14β,17β,20-heptanol3-O-β-D-glucopyranosyl-（1→4）-3-O-methyl-6-deoxy-β-D-allopyranosyl-（1→4）-β-D

8、-cymaropyranosyl-（1→4）-β-D-cymaropyranoside）。
　　3．體外細胞培養(yǎng)試驗表明，海楓藤總苷、流分Fr5、Fr9和化合物Ⅰ、Ⅱ能抑制體外培養(yǎng)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細胞的增殖，其中，流分Fr5、Fr9在100μg/ml的濃度作用下，抑制率分別為99.14%、95.00%，化合物Ⅰ、Ⅱ在100μg/ml的濃度作用下，抑制率分別為52.28%、59.51%。
　　結(jié)論：1.從海楓藤中分離得到5