柯薩奇病毒B3感染HeLa細(xì)胞后mTOR及下游信號(hào)蛋白表達(dá)的變化.pdf

1、目的:通過柯薩奇病毒B3(CVB3)感染體外培養(yǎng)的HeLa細(xì)胞，觀察mTOR信號(hào)通路及下游信號(hào)分子mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、4EBP1、p-4EBP1表達(dá)或活性的變化。
　　方法:以CVB3感染HeLa細(xì)胞后3、6、9、12、24h作為病毒組，以未被CVB3感染的同一時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞作為對(duì)照組;運(yùn)用Western Blot檢測(cè) mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、4EBP1、p-4EBP

2、1表達(dá)的變化;免疫熒光檢測(cè)mTOR信號(hào)通路下游分子4EBP1在細(xì)胞的定位。
　　結(jié)果:1、CVB3感染HeLa細(xì)胞后，不同時(shí)間點(diǎn)感染后mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、4EBP1、p-4EBP1表達(dá)含量變化及與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）:
　?、俨《窘MmTOR及p-mTOR的表達(dá)低于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組（P＜0.05），且隨時(shí)間延長(zhǎng)蛋白表達(dá)逐漸降低，對(duì)照組隨時(shí)間延長(zhǎng)蛋白表達(dá)逐漸增加;

3、　?、诓《窘Mp70S6K及p-p70S6K表達(dá)低于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組（P＜0.05），且隨時(shí)間延長(zhǎng)蛋白逐漸表達(dá)降低，對(duì)照組蛋白表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增加;
　?、鄄《窘M4EBP1、p-4EBP1蛋白表達(dá)均高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組（P＜0.05）。對(duì)照組4EBP1及p-4EBP1在9h時(shí)間點(diǎn)表達(dá)最低。病毒組4EBP1及p-4EBP1隨時(shí)間延長(zhǎng)蛋白表達(dá)逐漸升高。
　　2、通過直線相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)病毒組mTOR與p70S6K蛋白表達(dá)之間具有正相關(guān)關(guān)

4、系，對(duì)照組間無相關(guān)關(guān)系;病毒組mTOR與4EBP1蛋白表達(dá)之間具有負(fù)相關(guān)關(guān)系，而二者在對(duì)照組具有正相關(guān)關(guān)系;mTOR與p-mTOR兩組間均具有正相關(guān)關(guān)系，p70S6K與p-p70S6K蛋白表達(dá)病毒組具有正相關(guān)關(guān)系，對(duì)照組無相關(guān)關(guān)系。病毒組4EBP1與p-4EBP1蛋白表達(dá)無明顯相關(guān)，對(duì)照組具有正相關(guān)關(guān)系。
　　3.免疫熒光檢測(cè)4EBP1在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組以細(xì)胞質(zhì)表達(dá)為主，病毒組在胞質(zhì)胞核中均有表達(dá)，病毒組表達(dá)水平較對(duì)照組高。4EB