卡維地洛對體外柯薩奇病毒B3致心肌細胞凋亡與Bcl-2-Bax蛋白表達的影響.pdf

1、研究卡維地洛對體外柯薩奇病毒B3(CVB3)致心肌細胞凋亡的抑制作用與機制采用差速貼壁法培養(yǎng)原代Wistar乳鼠心肌細胞，實驗組分為正常對照組、病毒組、卡維地洛組及美托洛爾組，正常對照組加入不含血清的DMEM培養(yǎng)液，后三組于CVB3感染心肌細胞后分別加入不含血清的DMEM培養(yǎng)液、無血清培養(yǎng)基配制的卡維地洛、美托洛爾溶液。培養(yǎng)72h后，依次應用倒置相差顯微鏡觀察各組心肌細胞的形態(tài)、搏動速率，電鏡觀察心肌細胞形態(tài)學改變；分別采用黃嘌呤氧化酶

2、法測定心肌細胞培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸法測定心肌細胞培養(yǎng)液中丙二醛(MDA)含量、化學發(fā)光免疫法檢測心肌細胞培養(yǎng)液中肌鈣蛋白T(cTnT)水平、流式細胞術檢測各組心肌細胞凋亡率及免疫細胞化學法檢測心肌細胞內Bcl-2及Bax蛋白表達水平。
　　 1.倒置相差顯微鏡下可見病毒組心肌細胞的數量明顯減少，細胞團縮、變圓、成堆，搏動范圍明顯變小，搏動節(jié)律不規(guī)則、速率明顯降低。
　　 2.電鏡顯示病毒感染

3、的心肌細胞肌原纖維紊亂，z線模糊不清，細胞質內可見較多髓樣小體，腫脹的線粒體，嵴變短、斷裂，核周池腫脹，胞質內大量空泡形成，核膜內陷、核染色質濃縮、集邊、凝集成團塊狀。
　　 3.病毒組心肌細胞搏動速率(36.40±12.76)明顯低于正常對照組(135.20±13.97)(P<0.05)，卡維地洛組心肌細胞搏動速率(96.00±11.22)明顯高于病毒組(P<0.05)。
　　 4.卡維地洛組心肌細胞凋亡率(21.1±

4、4.00)明顯低于病毒組(38.4±7.12)及美托洛爾組(32.67±1.02)(P均<0.05)。
　　 5.與病毒組比較，卡維地洛組心肌細胞培養(yǎng)液中SOD活性(57.37±11.84vs.41.12±2.45)顯著升高(P<0.05)，MDA含量(2.19±1.63vs.7.13±1.68)及cTnT水平(5.19±1.81vs.10.86±0.9)均明顯降低（P均<0.05）。
　　 6.美托洛爾組與病毒組相比較

5、，心肌細胞培養(yǎng)液中SOD活性(42.77±6.31vs.41.12±2.45)、MDA含量(6.76±2.74vs.7.13±1.68)及cTnT水平(10.77+1.34vs.10.86±0.9)均無顯著差異（P均>0.05）。
　　 7.與病毒組及美托洛爾組比較，卡維地洛組心肌細胞內Bcl-2蛋白表達增強，Bax蛋白表達減弱。
　　 卡維地洛對于體外CVB3感染的心肌細胞具保護作用，其機制可能與其抗氧化活性、上調心肌