氨基肽酶N在類風濕關節(jié)炎作用機制的研究.pdf

1、目的:探討氨基肽酶N（aminopeptidase N，APN/CD13）對類風濕關節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）患者的骨破壞的影響，評價APN對RA骨破壞的預測和監(jiān)測意義。
　　方法:第一部分:將RA患者分為有骨質破壞組和無骨質破壞組，采用ELISA法檢測各組血清APN含量及腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）、白細胞介素17（interleukin-17，

2、IL-17）水平。通過獨立樣本T檢驗比較兩組RA患者血清APN、細胞因子水平差異，皮爾遜相關分析細胞因子和APN水平的相關性。第二部分:用流式細胞儀撿測人滑膜成纖維細胞在TNF-α、氨肽酶抑制劑bestatin的作用下的凋亡率差異；通過抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP）染色定性分析在TNF-α、bestatin誘導下，滑膜成纖維細胞轉化為破骨細胞的差異。
　　結果

3、:第一部分:（1）RA患者的血清APN濃度顯著高于正常對照組。（2）伴有骨質破壞的RA患者，其血清APN濃度高于無骨質破壞的RA患者，并且隨著RA患者雙手正位X線片報告的分級的增加，血清APN濃度增高。（3）RA患者的血清APN濃度和其DAS28、疼痛關節(jié)數(shù)、腫脹關節(jié)數(shù)、ESR、ACPA、CRP的相關性均無統(tǒng)計學差異。（4）以APN血清濃度作為RA骨破壞的預測指標，和RF、ACPA進行對比，APN的約登指數(shù)高于RF、ACPA的約登指數(shù)。

4、（5）RA患者的血清APN濃度和TNF-α的血清濃度存在正相關關系，而與IL-17的血清濃度不相關。第二部分:（1）在TNF-α不同濃度的干預下，滑膜成纖維細胞表面的CD13、CD14的表達并無明顯改變。（2）TNF-α干預組的滑膜成纖維細胞早期凋亡率較對照組高。bestain干預組的滑膜成纖維細胞的早期凋亡率較對照組高。（3）低濃度TNF-α組滑膜成纖維細胞的早期凋亡率高于高濃度TNF-α組。（4）TNF-α、bestatin在不同時

5、間段干預滑膜成纖維細胞后，即第40h、52h、64h后細胞早期凋亡率的變化趨勢相同。（5）bestatin增加了高濃度TNF-α的滑膜成纖維細胞的早期凋亡率，對低濃度TNF-α的凋亡誘導作用沒有影響。（6）對照組中，滑膜成纖維細胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色呈陰性，TNF-α干預組中，滑膜成纖維細胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色呈陽性；bestatin聯(lián)合TNF-α干預組中，滑膜成纖維細胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色呈陰性。
　　結論:（1）APN的