糖尿病合并心肌梗死對兔心臟副交感神經(jīng)的影響及其與室性心律失常關(guān)系的研究.pdf

1、研究背景及目的
　　 隨著社會(huì)的發(fā)展與人們生活模式的改變,糖尿病(diabetesmellitus,DM)發(fā)病率呈現(xiàn)逐年遞增的趨勢。資料顯示,糖尿病人群死亡率是非糖尿病人群的3倍。在胰島素及抗生素應(yīng)用以前,糖尿病性酮癥酸中毒及感染是其主要死亡因?yàn)?。隨著醫(yī)療衛(wèi)生條件的改善,心腦血管疾病、腎臟病變等各種慢性并發(fā)癥逐漸成為其主要死亡因?yàn)?其中心肌梗死(myocardialinfarction,MI)是其嚴(yán)重類型。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,DM患者的

2、急性心肌梗死(acutemyocardialinfarction,AMI)發(fā)病率比非DM患者高2-3倍,是DM患者的主要死亡因?yàn)橹?因此DM與MI間關(guān)聯(lián)的研究越來越受到重視。糖尿病合并心?；颊甙l(fā)生室性心律失常和猝死的危險(xiǎn)性也較單純糖尿病或心梗有明顯增高。多項(xiàng)及我們既往研究證實(shí),心肌梗死后存在心臟自主神經(jīng)重構(gòu),與心梗后室性心律失常和猝死的發(fā)生有著密切的關(guān)系；而大量研究證實(shí)糖尿病本身也存在不同程度心臟自主神經(jīng)損害,但對于DM自主神經(jīng)病變基

3、礎(chǔ)上發(fā)生MI后心臟自主神經(jīng)的變化,以及與室性心律失常的相關(guān)性卻鮮有報(bào)道。
　　 近年來,對于心肌梗死后心臟自主神經(jīng)的改變研究較多,但主要針對交感神經(jīng)。多項(xiàng)及我們既往研究發(fā)現(xiàn)心梗后交感神經(jīng)從失神經(jīng)支配到大量增生的動(dòng)態(tài)演變過程,造成了交感神經(jīng)空間分布進(jìn)一步不均一的現(xiàn)象,其在室性心律失常和心源性猝死的發(fā)生、維持中具有重要作用。但對于心梗后副交感神經(jīng)改變的相關(guān)研究鮮有報(bào)道。近來,有研究表明心梗后副交感神經(jīng)改變對于MI后心肌電重構(gòu)以及交感

4、神經(jīng)重構(gòu)有重要影響,但其在心梗后重構(gòu)過程以及與心律失常關(guān)系仍有待進(jìn)一步研究。
　　 本研究旨在:1)建立兔DM合并MI模型,采用免疫組織化學(xué)及實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR,研究DM合并MI后副交感神經(jīng)重構(gòu)的特征；2)采用程序電刺激(programmedelectricalstimulation,PES)的方法誘發(fā)室性心律失常,探討DM合并MI后副交感神經(jīng)的變化和室性心律失常易感性的關(guān)系。
　　 材料與方法
　　 65

5、只新西蘭兔隨機(jī)分為4組:假手術(shù)組(Sham組,n=15)開胸打開心包后冠狀動(dòng)脈穿線,不結(jié)扎；MI組(n=15)開胸結(jié)扎冠狀動(dòng)脈制作MI模型；糖尿病假手術(shù)組(DM,n=15)普通飼料喂養(yǎng)1周后由耳緣靜脈注射80mg/Kg體重四氧嘧啶繼續(xù)喂養(yǎng)8周后開胸冠脈穿線,不結(jié)扎;糖尿病合并心肌梗死組(DM+MI,n=20)在DM組模型基礎(chǔ)上開胸結(jié)扎冠狀動(dòng)脈。8周后,所有成活的新西蘭兔進(jìn)行程序電刺激誘發(fā)室性心律失常試驗(yàn);隨后處死動(dòng)物,從梗死周邊、左室游

6、離壁、室間隔和右心室取材,采用免疫組化方法觀察乙酰膽堿酯酶(acetylcholineesterase,AChE)陽性神經(jīng)纖維的形態(tài)、分布和密度,實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法觀察梗死灶周AChEmRNA表達(dá)水平的變化。
　　 結(jié)果
　　 DM組實(shí)驗(yàn)兔有1只未成模,2只因嚴(yán)重高血糖及其并發(fā)癥死亡,最終有12只兔達(dá)到成膜標(biāo)準(zhǔn)并存活至實(shí)驗(yàn)結(jié)束；MI組有3只實(shí)驗(yàn)兔死亡；DM+MI組有5只實(shí)驗(yàn)兔死亡。
　　 程序電刺激誘發(fā)

7、室性心律失常實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),Sham組、DM組、MI組、DM+MI組室性心律失常誘發(fā)率分別為13.3％,50.0％*,66.7％＃,80.0％?！?*P<0.05vs.Sham,＃P<0.01vs.Sham,§P<0.05vs.DM)。
　　 免疫組織化學(xué)研究發(fā)現(xiàn)AChE陽性神經(jīng)纖維,Sham組主要分布在血管周圍,與血管相伴行,心肌束間的結(jié)締組織也有分布；DM組AChE陽性神經(jīng)纖維的分布與Sham組相似,但神經(jīng)纖維的密度均低于Sham

8、組相對應(yīng)部位(P<0.01)；MI組AChE陽性神經(jīng)纖維空間分布紊亂,在小血管周圍,心肌束間的結(jié)締組織,以及梗死心肌與存活心肌相互交錯(cuò)的梗死灶周均有分布,部分神經(jīng)纖維粗大,密度較Sham組增高(P<0.01)；DM+MI組神經(jīng)分布紊亂,密度較糖尿病組增加(P<0.05)。
　　 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測AChEmRNA結(jié)果發(fā)現(xiàn),與Sham組相比,DM組降低(P<0.05),MI組升高(P<0.05)；與DM組AChEmRNA