酵母表達的MIP-2γ-GM-CSF融合蛋白的生物學(xué)功能及其相關(guān)機制研究.pdf

1、本研究通過基因工程方法構(gòu)建高表達MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白的酵母工程菌株，并優(yōu)化發(fā)酵、純化條件。以MTT法和集落形成實驗檢測MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白在體外的促造血增殖活性；以transwell體系檢測融合蛋白對免疫造血細胞的趨化活性，進行了動物體內(nèi)實驗，研究MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白對放療引起的造血損傷的修復(fù)作用和對荷瘤小鼠的抗腫瘤效應(yīng)，并研究了其相關(guān)的作用機制。本課題分為兩部分：在第一部分研究中，我們通過基因

2、工程方法構(gòu)建篩選了高表達MIP-2γ/hGM-CSF、MIP-2γ/mGM-CSF融合蛋白的酵母工程菌株，并通過優(yōu)化發(fā)酵、純化技術(shù)，制備了兩種融合蛋白。在第二部分研究中，我們首先證實了MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白在體外能夠顯著促進造血細胞增殖，有效趨化免疫活性細胞，并研究了其作用機制。在此基礎(chǔ)上進行動物體內(nèi)實驗，顯示MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白對放療造成的造血損傷具有良好的治療作用，同時具有一定的抗腫瘤效應(yīng)。我們還首次發(fā)現(xiàn)M