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文檔簡介
1、目的:制備188Re標記血管靶向性NGR-干擾素-α2a(NGR-interferon- alpha2a; NGR-IFN-α2a),觀察其在荷瘤小鼠體內的動態(tài)分布及SPECT/CT顯像。
方法:1、采用SnCl2(Stannous Chloride氯化亞錫)作為還原劑,直接標記法制備188Re-NGR-IFN-α2a,測定標記物的標記率和放射化學純度(RCP),并對標記和非標記的NGR-IFN-α2a進行生物學活性鑒定,同時
2、進行體外細胞特異性結合實驗;
2、建立肝癌HEPG2細胞SCID小鼠雙側臀部皮下腫瘤模型,選取SCID小鼠及正常小鼠各40只,分為8組,5只/組,采用尾靜脈注射,每只注射7.4 MBq(0.2 mL),于注射后0.5、1、2、4、6、8、12、24h各個時間段內處死1組小鼠,取重要組織器官、血液及腫瘤組織,稱取各部分的重量并測量放射性計數(shù),經物理衰變校正后計算每克組織百分注射劑量率(%ID/g),選取腫瘤組織為靶組織(T),肌
3、肉組織為非靶組織(NT),測定不同時間點的T/NT值;
3、選取5只荷瘤小鼠動物模型,采用尾靜脈注射,每只注射188Re-NGR-IFN-α2a7.4 MBq(0.2 mL),并于注射后0.5、1、2、4、6、8、12、24、48h進行SPECT/CT靜態(tài)及斷層融合顯像,利用感興趣區(qū)(ROI)技術,以肌肉組織作為NT,測定顯像過程中不同時間點的T/NT值。
結果:1、標記:188Re-NGR-IFN-α2a的標記率>
4、80%,放化純>95%,在室溫下放置24 h后的放化純度為(57.3±0.3)%,特異性細胞結合率最高為44.80%;含NGR-IFN-α2a和188Re-NGR-IFN-α2a的兩組Wish細胞之間的OD值相比較,t=0.42,P>0.05。
2、正常小鼠及荷瘤小鼠的體內分布:188Re-NGR-IFN-α2a注射后1 h腎臟放射性逐漸增加,2 h消化道放射性開始逐漸增加,4h后荷瘤小鼠心血池內放射性計數(shù)明顯下降,腫瘤攝取高
5、峰期在注射后6 h,在24小時仍有較高攝取,T/NT值最高為19.84,平均12.39。
3、腫瘤動物顯像:采用尾靜脈注射188Re-NGR-IFN-α2a7.4 MBq(0.2 mL),靜態(tài)采集,顯像條件為矩陣128×128,Zoom1.60,能峰155 keV,每幀采集200 k計數(shù),腫瘤在注射后0.5h已經開始逐漸顯影,顯影最清晰的時間段為注射后4-8h,48h后腫瘤顯影清晰度逐漸減低,采用感興趣區(qū)(ROI)技術測得T/
6、NT值最高11.37,平均值7.37。
結論:1、188Re標記NGR-IFN-α2a簡便易行,標記率及放化純度均較高,放射性核素標記后對NGR-IFN-α2a復合物的生物學活性無明顯影響,標記物在體外較穩(wěn)定,體外受體結合特異性較好。
2、188Re-NGR-IFN-α2a在荷瘤小鼠血液內清除迅速,主要經腎臟排泄,部分經消化道排泄,其他組織的放射性隨時間逐漸減低,腫瘤組織攝取率高,且在腫瘤組織內停留時間較長。
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