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1、目的:觀察大鼠腦實(shí)質(zhì)內(nèi)遠(yuǎn)位觸液神經(jīng)元中絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)即p38MAPK、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)和c—J un氨基末端蛋白激酶(JNK)的分布及其在噪聲應(yīng)激時(shí)的表達(dá),探討腦內(nèi)特殊類型神經(jīng)元的功能意義及其在噪聲應(yīng)激反應(yīng)中的作用。 材料和方法:實(shí)驗(yàn)用SD大鼠,制作噪聲應(yīng)激動(dòng)物模型,用霍亂毒素亞單位B與辣根過氧化物酶復(fù)合物(CB-HRP)追蹤和免疫組織化學(xué)相結(jié)合的雙重標(biāo)記技術(shù),觀察p-38MAPK、p-ERK、p
2、-JNK在大鼠腦內(nèi)遠(yuǎn)位觸液神經(jīng)元的分布及其在不同噪聲應(yīng)激時(shí)間的表達(dá)變化。 結(jié)果:在腦干的特定部位恒定出現(xiàn)CB-hRP標(biāo)記的兩組神經(jīng)細(xì)胞簇,其他腦區(qū)未見CB-HRP標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞簇。1.不予應(yīng)激刺激,該細(xì)胞簇內(nèi)僅有個(gè)別神經(jīng)元見有CB-HRP/p-p38MAPK、CB-HRP/p-ERK雙重標(biāo)記;未見CB-HRP/p-JNK雙重標(biāo)記神經(jīng)元。2.噪聲應(yīng)激刺激1天時(shí),上述特定部位細(xì)胞簇的CB-HRP/p-p38MAPKCB-HRP/p-E
3、RK雙重標(biāo)記神經(jīng)元數(shù)目增多(p<0.05),未見CB-HRP/p-JNK雙重標(biāo)記神經(jīng)元。3.噪音應(yīng)激刺激5天時(shí),CB-HRP/p-p38MAPK雙重標(biāo)記神經(jīng)元數(shù)目較對(duì)照組顯著增多(p<0.05),僅見1-2個(gè)CB-HRP/p-ERK雙重標(biāo)記神經(jīng)元,未見CB-HRP/p-JNK雙重標(biāo)記神經(jīng)元。4.噪音應(yīng)激刺激10天時(shí),CB—HRP/p-p38MAPK雙重標(biāo)記神經(jīng)元數(shù)目較對(duì)照組顯著增多(p<0.05),僅見2—3個(gè)CB-HRP/p-ERK雙
4、重標(biāo)記神經(jīng)元,未見CB-HRP/p-YNK雙重標(biāo)記神經(jīng)元;噪音應(yīng)激刺激20天時(shí),CB-HRP/p-p38MAPK雙重標(biāo)記神經(jīng)元數(shù)目較對(duì)照組顯著增多(p<0.01),CB-HRP/p-ERK雙重標(biāo)記神經(jīng)元數(shù)目較對(duì)照組顯著增多(p<0.01),較1天組也明顯增多(p<0.05),未見CB—HRP/p-JNK雙重標(biāo)記神經(jīng)元。 結(jié)論:在腦實(shí)質(zhì)的特定部位恒定存在兩組遠(yuǎn)位觸液神經(jīng)元細(xì)胞簇,非應(yīng)激條件下該細(xì)胞簇中僅有少數(shù)神經(jīng)元含有p-p38M
5、APK、p-ERK,但未發(fā)現(xiàn)含有p-JNK;當(dāng)給予動(dòng)物不同時(shí)程(1,5,10,20天)的噪聲應(yīng)激刺激時(shí),p-p38MAPK遠(yuǎn)位觸液神經(jīng)元的數(shù)量隨應(yīng)激天數(shù)增加而日趨增加; p-ERK遠(yuǎn)位觸液神經(jīng)元的數(shù)量?jī)H在噪音應(yīng)激1天和20天時(shí)顯著增多,且噪音應(yīng)激20天時(shí)增多更明顯,而在噪音應(yīng)激5,10天時(shí)表達(dá)較少;未見有p-JNK遠(yuǎn)位觸液神經(jīng)元參與不同時(shí)程的應(yīng)激反應(yīng)活動(dòng)。結(jié)果提示:遠(yuǎn)位觸液神經(jīng)元是腦內(nèi)恒定存在的特殊神經(jīng)元,其中的p-p38MAPK遠(yuǎn)位觸
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