褪黑素對(duì)實(shí)驗(yàn)性肺纖維化大鼠P38MAPK表達(dá)的研究.pdf

1、目的:
　　 肺間質(zhì)纖維化（pulmonary fibrosis）是種由多種原因引起的肺部疾病，目前的治療手段欠佳，加深對(duì)肺纖維化機(jī)制的研究，并尋找新的治療策略迫在眉睫。已有文獻(xiàn)證實(shí)，在博來(lái)霉素(bleomycin，BLM)誘導(dǎo)的肺纖維化動(dòng)物模型中，氧化應(yīng)激扮演了重要角色，P38絲裂原活化蛋白激酶(P38mitogen-activated protein kinase，P38MAPK)通路可以被氧化應(yīng)激信號(hào)激活，而褪黑素(mel

2、atonin，MT)具有強(qiáng)大的抗氧化作用，因此本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)觀察MT對(duì)BLM致肺纖維化大鼠P38MAPK表達(dá)的影響，為防治肺間質(zhì)纖維化找到新方法。
　　 材料和方法:
　　 健康雌性SD大鼠45只，隨機(jī)分為3組，每組15只，分別為模型組，干預(yù)組及對(duì)照組。模型組和干預(yù)組均一次性氣管內(nèi)注入BLM(5mg/kg)，對(duì)照組氣管注入同體積生理鹽水。干預(yù)組于造模前2天腹腔注射褪黑素(4mg/kg.d-1)，而模型組和對(duì)照組給予腹腔注射同

3、體積生理鹽水。每組分別于造模后第7，14，28天各隨機(jī)處死5只大鼠。左肺立即放于凍存管中-80℃保存，供PCR方法檢測(cè)，右肺置于10％甲醛固定，供HE染色、Masson三聯(lián)染色和免疫組織化學(xué)方法檢查。大鼠肺組織采用HE染色和Masson染色了解肺泡炎和肺纖維化的情況，用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)大鼠肺組織P38MAPK和FN的表達(dá)情況；用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈半定量（RT-PCR）方法檢測(cè)肺組織P38MAPKmRNA表達(dá)的水平。
　　 結(jié)果

4、:
　　 病理檢查結(jié)果顯示：模型組第7天一部分肺泡腔變小或者塌陷、肺間隔明顯變寬，大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，炎癥改變明顯；第14天炎癥細(xì)胞減少，出現(xiàn)少量膠原沉積；第28天肺間質(zhì)大量膠原沉積，纖維化改變明顯。肺組織中P38MAPK(蛋白和mRNA)和FN(蛋白)在對(duì)照組表達(dá)較少，而模型組在第7天表達(dá)增強(qiáng)，第14天明顯增強(qiáng)，達(dá)到高峰，第28天較第14天開(kāi)始減弱；干預(yù)組在各時(shí)間點(diǎn)上升幅度均低于模型組，但仍強(qiáng)于對(duì)照組，數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜