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文檔簡介
1、目的:建立瑞香狼毒藥材蛋白質(zhì)部位提取分離的方法和體外活性研究的方法。 方法:飽和硫酸銨鹽析法沉淀總蛋白;SephadexG-150、SephadexG-100、SephadexG-50凝膠梯度分離不同分子量的蛋白;SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法鑒別分離出的蛋白的分子量;瓊脂糖擴(kuò)散法測定總蛋白的抑菌活性;MTT細(xì)胞培養(yǎng)法測定總蛋白及分離得到的6個分子量蛋白對肝癌細(xì)胞生長的抑制作用及對正常細(xì)胞的毒性作用。 結(jié)果:提取分離得到6
2、個不同分子量的蛋白1-6,通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法鑒定它們的分子量依次為:14.4 KDa、35.0 KDa、28.0 KDa、23.0 KDa、10.0 KDa、94.0 KDa;體外活性研究結(jié)果表明,總蛋白沒有抑菌活性但具有抗腫瘤活性和細(xì)胞毒性;分離得到的6個分子量的蛋白中2、3、4、6對腫瘤細(xì)胞有抑制作用,1、3、4對正常細(xì)胞有毒性作用。 結(jié)論:本論文的方法可作為瑞香狼毒藥材中蛋白質(zhì)提取分離與生物活性研究的方法,為
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