油茶粕蛋白質(zhì)的分離提取、理化性質(zhì)及體外消化產(chǎn)物的抗氧化性研究.pdf

1、我國(guó)是油茶產(chǎn)量大國(guó)，目前油茶的開(kāi)發(fā)利用多集中于壓榨茶油，而榨油后的油茶粕利用率極低，不僅造成了資源的浪費(fèi)，而且?guī)?lái)帶來(lái)一定的環(huán)境壓力。油茶粕中含有大量的生物活性成分，具有一定的生理功能。因此，研究這些活性成分并加以利用，對(duì)提高油茶粕綜合利用率具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本文對(duì)油茶粕中的蛋白質(zhì)做了較為系統(tǒng)的研究，首先采用分步提取法提取油茶粕中的各類蛋白質(zhì)，對(duì)其中含量較高且抗氧化性均較強(qiáng)的清蛋白進(jìn)行提取工藝優(yōu)化，再分離出清蛋白中的抗氧化功能力較強(qiáng)的

2、蛋白，分子量為14000Da;探討了油茶粕分離蛋白的功能及理化性質(zhì);通過(guò)體外消化模型，研究了油茶粕分離蛋白在消化過(guò)程中的抗氧化活性變化，發(fā)現(xiàn)有一組分抗氧化能力顯著增強(qiáng)，可能對(duì)腸道具有保護(hù)作用。本研究的主要內(nèi)容與結(jié)果如下:
　　 1.分步提取了茶粕中各類蛋白質(zhì)并進(jìn)行羥自由基(·OH)清除實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明:茶粕中主要以清蛋白和谷蛋白為主，分別占茶粕總蛋白含量的45.86％和40.33％，且在同一濃度下，清蛋白的自由基清除能力最大，在樣

3、品濃度為2mg/mL時(shí)其清除率為38.56％，8mg/mL時(shí)清除率為92.13％，呈現(xiàn)出濃度依賴性關(guān)系。而茶粕蛋白中醇溶性蛋白和球蛋白含量較少，分別占總蛋白含量的4.25％和5.62％。茶粕球蛋白羥自由基(·OH)清除能力極弱。因此選擇含量較高且功能性較強(qiáng)的清蛋白做進(jìn)一步研究。
　　 2.針對(duì)茶粕中含量較高且羥自由基清除率較強(qiáng)的清蛋白采用響應(yīng)面法(RSM)優(yōu)化其提取工藝。結(jié)果顯示，茶粕清蛋白的最優(yōu)工藝參數(shù)為:溫度為47℃，料液比

4、為1∶15，時(shí)間為50min，清蛋白提取率為77.98％。
　　 3.采用陰離子交換柱DEAE-Sephadex A-25和凝膠層析柱SephadexG-50對(duì)茶粕清蛋白進(jìn)行分離，獲得具較高自由基清除率的功能性組分。結(jié)果表明:經(jīng)DEAE-Sephadex A-25分離后得到活性成分B組分，羥自由基(·OH)清除率為59.02％，再經(jīng)Sephadex G-50對(duì)茶粕清蛋白B組分進(jìn)行分離，得到抗氧化活性較高的B-2蛋白組分，其羥自由

5、基(·OH)清除率達(dá)70.82％。B-2組分經(jīng)凝膠電泳，測(cè)得其分子量約為14000Da。
　　 4.研究了茶粕分離蛋白(TPI)的功能及理化性質(zhì)。與大豆分離蛋白(SPI)相比，TPI水溶解性較好，溶解度達(dá)到72.57％，乳化性和乳化穩(wěn)定性也較SPI強(qiáng)，但泡沫穩(wěn)定低于SPI，30℃下持油力為3.12g/g，高于SPI(2.51g/g)，持水力為2.93g/g，低于SPI(3.67g/g)。經(jīng)差示熱量掃描(DSC)分析，得知茶粕分離

6、蛋白的變性溫度為88.33℃。
　　 5.探討了茶粕分離蛋白(TPI)對(duì)腸道的保護(hù)作用，并對(duì)其功能性組分進(jìn)行分離。模擬胃腸液消化后，TPI最終消化率達(dá)到80.01％。再將模擬胃腸液消化120min后的消化產(chǎn)物經(jīng)大孔樹(shù)脂DA201-C純化，測(cè)得其灰分含量由6.74％下降至0.53％，肽類物質(zhì)含量從86.65％增加到92.79％，且抗氧化活性顯著增強(qiáng)，羥自由基的清除率由61.75％提高至72.78％，超氧陰離子(·O2-)清除率由4