環(huán)氧合酶及其抑制劑對人晶狀體上皮細胞影響的實驗研究.pdf

1、Y8 啪明分類號旦! ! ! 一 單位代碼：呻1 5 9學 號：2 0 0 1 1 6 1 1 0中回鍪種夫零博士學位論文玨 目：環(huán)氧臺酶及其抑制劑對人晶狀體上皮細胞影響的實驗研究1 k 豳c t 0 fC O X _ 2a n d i l s i n h i b i t o 島o nh ㈨l e n 8e p i t h d 湖c e u研究生：——塾—璺一導(dǎo) 師： 堂堂壁學科專業(yè)： 墾登芏論文課題起止時同：! ! 墮±!

2、基= 2 Q 鯉主! 墨論文完戚時聞：2 堅主! 墨／飛以C O x 也作為靶點，通過c o x ．2 抑制劑抑制細胞增殖，是目前該領(lǐng)域研究的熱點。阿司匹林是環(huán)氧合酶非選擇性抑制劑。作為葚# 甾體類抗炎藥物( n o n ．s t e r o i d a la n t i —i 1 1 f l 秈a t o r yd m g ，N S A I D ) 的代表，廣泛用于抗炎、止痛和抗血栓形成。另外，由于阿司匹林可拮抗C 0 x 的活性，對

3、產(chǎn)生較多C O X 的腫瘤組織、平滑肌細胞、血管內(nèi)皮細胞等具有抑制作用，對促進損傷組織的修復(fù)、減輕炎癥反應(yīng)和維持正常的血液動力學狀態(tài)具有積極的作用。隨著人們對環(huán)氧合酶認識的提高，C O x - 2 在抗炎或促炎方面具體作用的研究的進展，激發(fā)了人們對N S A I D 作用機制的深入了解，阿司匹林的作用再次得到重視。由于阿司匹林價格低廉、藥源充分，深入研究其作用機理，擴大阿司匹林的臨床應(yīng)用范圍，減少藥物的副作用，無疑將有重大的l l 缶床

4、意義。鑒于此，我們作出這樣一個推測：白內(nèi)障手術(shù)引起的創(chuàng)傷和炎癥反應(yīng)，刺激b F G F 的生成，通過M A P K 途徑啟動了細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，誘導(dǎo)晶狀體上皮細胞中C 0 x - 2 的表達，進而使P G E ：合成增加，再通過其可能的對D N A 合成的調(diào)控作用，導(dǎo)致晶狀體上皮細胞增生，引起后發(fā)性白內(nèi)障的形成。因此，應(yīng)用C O X 的抑制劑和M A P K s 信號通路特異性的阻斷劑，將會抑制由此引發(fā)的晶狀體上皮細胞的增生，誘導(dǎo)細

5、胞凋亡，達到防治后發(fā)性白內(nèi)障的目的。為證實所作的推測，本實驗從b F G F 對培養(yǎng)的人晶狀體上皮細胞增殖的作用機制，以及誘導(dǎo)的c o x ．2 基因表達著手。通過研究b F G F 作用后，引起的晶狀體上皮細胞增殖、C O x _ 2 的表達、阿司匹林對C O x - 2 表達的抑制和促進晶狀體上皮細胞的凋亡作用，以及M A P 弛信號通路在這些過程中所發(fā)揮的作用。來探討C O x - 2 及其抑制劑阿司匹林在后發(fā)性白內(nèi)障形成中的可能

6、的作用機制，為后發(fā)性白內(nèi)障的防治提供實驗依據(jù)。方 法本研究分為三部分第一部分細胞傳代培養(yǎng)及b Ⅳ珂誘導(dǎo)的C O X - 2 表達的檢測凍存的細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，取第三代細胞用于實驗。用s P 免疫組化法檢測b F G F 刺激6 小時后C O X ．2 蛋白的表達，并與對照組相比較，以胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性表達；采用R T - P C R 和W e s t e r n b l o t 方法檢測b F G F 刺激·2 ·