核心蛋白多糖對兔晶狀體上皮細胞增生的抑制作用.pdf

1、目的:探討核心蛋白多糖(Decorin)對兔晶狀體上皮細胞(lens epithelial cells, LEC)增殖的抑制作用及其劑量一效應與時間一效應的關系,為藥物防治后發(fā)性白內障提供新的選擇。
　　方法:MTT比色法分別測定不同濃度的Decorin(0.1mg·L-1,1mg·L-1,10mg·L-1)作用于LEC不同時間后的細胞生長抑制率;采用流式細胞技術測定細胞周期,用ELISA法檢測各組培養(yǎng)液上清中TGF-β的水平,R

2、T-PCR測定TGF-βmRNA的表達,免疫細胞化學觀察α-平滑肌肌動蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)。
　　結果:MTT比色法實驗結果顯示,24h對照組抑制率為(3.62±1.34)％,0.1mg·L-1,1mg·L-1和10mg·mL-1，Decorin組抑制率分別為(4.14±2.08)％,(12.93±2.47)％,(23.47±1.78)％,LEC生長抑制率增加(P＜0.05),隨著Deco

3、rin作用時間延長,生長抑制率增加(P＜0.05),流式細胞技術示,隨藥物濃度及作用時間延長,LEC出現明顯的G0/G1期阻滯,G0/G1期細胞所占比例明顯升高(P＜0.05),ELISA示,對照組TGF-β水平為427.24±41.34 ng/細胞,0.1 mg·L-1,1 mg·L-1和10mg·mL-1，Decorin組TGF-β水平分別為236.01±28.63 ng·細胞-1,117.86±18.14 ng·細胞-1,111.

4、72±26.72 ng·細胞-1,與對照組有明顯的差別(P＜0.05),RT-PCR示Decorin組TGF-βmRNA表達明顯減少,與MTT法檢測結果呈現大致相同的趨勢,免疫細胞化學觀察,對照組α-SMA表達較多,細胞肥大,細胞質呈棕色,Decorin組α-SMA較少表達。Decorin表現出明顯的抑制作用。
　　結論:Decorin對LEC有抑制增生和誘導凋亡作用,且呈明顯的劑量-效應與時間-效應關系,可望成為后發(fā)性白內障的防