大鼠急性酒精性肝損傷發(fā)病機(jī)制及水飛薊素對(duì)其保護(hù)作用的研究.pdf

1、研究背景：乙醇引起的肝損傷的發(fā)病機(jī)制至今尚未明確，其中氧化應(yīng)激和膜磷脂過氧化作用在急性酒精性肝損傷的發(fā)生和發(fā)展起重要作用。CYP2E1是細(xì)胞色素P450的酒精誘導(dǎo)形式,不僅參與了藥物的代謝,而且還能催化乙醇的代謝并產(chǎn)生具有更強(qiáng)毒性的代謝產(chǎn)物，由其所引起的氧化應(yīng)激和膜磷脂過氧化可在短期內(nèi)導(dǎo)致肝臟的損傷，是酒精性肝損傷的重要發(fā)病機(jī)制。水飛薊素具有強(qiáng)力抗氧化性,是一種安全、穩(wěn)定、有效的保肝藥物，但其對(duì)急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用目前研究很少，且

2、具體作用機(jī)制也尚不明確。因此，建立急性酒精性肝損傷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，探討乙醇引起的肝損傷的發(fā)病機(jī)制及藥物防治甚為重要。
　　 目的：建立急性酒精性肝損傷模型，探討水飛薊素對(duì)大鼠急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。
　　 方法：32只雄性SD大鼠被隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、水飛薊素低劑量組和水飛薊素高劑量組，每組8只。除正常組等劑量以生理鹽水灌胃外，其余各組均以乙醇灌胃，5g/kg，水飛薊素各劑量組在乙醇

3、灌胃1 h 后再分別給予水飛薊素100 mg/kg和200 mg/kg 灌胃，連續(xù)5d（1次/d），末次乙醇灌胃并禁食6小時(shí)后將全部大鼠麻醉并處死，腹主動(dòng)脈取血，生化法檢測(cè)大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）活性、總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）含量和肝勻漿

4、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量。肝組織標(biāo)本 HE 染色后觀察肝臟病理形態(tài)學(xué)改變，并用免疫組化法測(cè)定肝組織中腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain

5、reaction，RT-PCR）檢測(cè)肝臟細(xì)胞色素P450 2E1（Cytochrome P450 2E1，CYP2E1）mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：成功復(fù)制出大鼠急性酒精性肝損傷模型。與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組肝細(xì)胞可見明顯脂肪變性，肝細(xì)胞腫脹明顯，肝小葉內(nèi)可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和肝細(xì)胞點(diǎn)狀壞死；血清中 ALT、AST 活性明顯增高（P<0.05）；肝組織勻漿中MDA含量顯著增高（P<0.01）；肝組織中TNF-α和IL-1β表達(dá)

6、明顯升高（P<0.01）；肝臟 CYP2E1 mRNA的表達(dá)明顯增高（P<0.01）。與模型對(duì)照組比較，水飛薊素各劑量組肝細(xì)胞脂肪變性、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及壞死程度均降低，肝組織病理變化程度明顯減輕；血清ALT活性、肝勻漿MDA水平明顯降低（P<0.01和 P<0.05），SOD 活性升高（P<0.05），肝組織中 TNF-α和 IL-1β表達(dá)明顯減少（P<0.01），肝臟 CYP2E1 mRNA的表達(dá)明顯減少（P<0.05），水飛薊素高劑量