大鼠急性酒精性肝損傷發(fā)病機制及水飛薊素對其保護作用的研究.pdf

1、研究背景：乙醇引起的肝損傷的發(fā)病機制至今尚未明確，其中氧化應激和膜磷脂過氧化作用在急性酒精性肝損傷的發(fā)生和發(fā)展起重要作用。CYP2E1是細胞色素P450的酒精誘導形式,不僅參與了藥物的代謝,而且還能催化乙醇的代謝并產(chǎn)生具有更強毒性的代謝產(chǎn)物，由其所引起的氧化應激和膜磷脂過氧化可在短期內(nèi)導致肝臟的損傷，是酒精性肝損傷的重要發(fā)病機制。水飛薊素具有強力抗氧化性,是一種安全、穩(wěn)定、有效的保肝藥物，但其對急性酒精性肝損傷的保護作用目前研究很少，且

2、具體作用機制也尚不明確。因此，建立急性酒精性肝損傷實驗動物模型，探討乙醇引起的肝損傷的發(fā)病機制及藥物防治甚為重要。
　　 目的：建立急性酒精性肝損傷模型，探討水飛薊素對大鼠急性酒精性肝損傷的保護作用及其可能的作用機制。
　　 方法：32只雄性SD大鼠被隨機分為4組：正常對照組、模型對照組、水飛薊素低劑量組和水飛薊素高劑量組，每組8只。除正常組等劑量以生理鹽水灌胃外，其余各組均以乙醇灌胃，5g/kg，水飛薊素各劑量組在乙醇

3、灌胃1 h 后再分別給予水飛薊素100 mg/kg和200 mg/kg 灌胃，連續(xù)5d（1次/d），末次乙醇灌胃并禁食6小時后將全部大鼠麻醉并處死，腹主動脈取血，生化法檢測大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）活性、總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）含量和肝勻漿

4、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量。肝組織標本 HE 染色后觀察肝臟病理形態(tài)學改變，并用免疫組化法測定肝組織中腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）表達，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應（reverse transcription-polymerase chain

5、reaction，RT-PCR）檢測肝臟細胞色素P450 2E1（Cytochrome P450 2E1，CYP2E1）mRNA的表達。
　　 結(jié)果：成功復制出大鼠急性酒精性肝損傷模型。與正常對照組比較，模型對照組肝細胞可見明顯脂肪變性，肝細胞腫脹明顯，肝小葉內(nèi)可見炎癥細胞浸潤和肝細胞點狀壞死；血清中 ALT、AST 活性明顯增高（P<0.05）；肝組織勻漿中MDA含量顯著增高（P<0.01）；肝組織中TNF-α和IL-1β表達

6、明顯升高（P<0.01）；肝臟 CYP2E1 mRNA的表達明顯增高（P<0.01）。與模型對照組比較，水飛薊素各劑量組肝細胞脂肪變性、炎癥細胞浸潤及壞死程度均降低，肝組織病理變化程度明顯減輕；血清ALT活性、肝勻漿MDA水平明顯降低（P<0.01和 P<0.05），SOD 活性升高（P<0.05），肝組織中 TNF-α和 IL-1β表達明顯減少（P<0.01），肝臟 CYP2E1 mRNA的表達明顯減少（P<0.05），水飛薊素高劑量