PDTC干預(yù)下大鼠急性酒精性肝損傷中NF-kB作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的：本研究通過短時期大量酒精灌胃的方法建立急性酒精性肝損傷動物模型，同時給予腹腔注射NF-kB阻斷劑PDTC，探討在PDTC干預(yù)下大鼠急性酒精性肝損傷中NF-kB的作用機(jī)制及對炎性介質(zhì)表達(dá)的影響。
　　方法：
　　1. Wistar大鼠（清潔級）60只隨機(jī)分為三組，模型組、PDTC干預(yù)組和對照組。模型組給予55％酒精8g/kg.d，分二次灌胃，共14天，于第三天起再給予生理鹽水腹腔注射；PDTC干預(yù)組于酒精灌胃第三天起，于

2、酒精灌胃前30分鐘給予PDTC腹腔注射，50mg/kg.d，余操作同模型組；對照組給予等量的生理鹽水灌胃及腹腔注射。實驗第7天和第14天末次灌胃及腹腔注射后12小時處死動物,心臟采血分離血清，采血后立即取肝組織用10%中性福爾馬林固定。
　　2.利用全自動生化分析儀檢測血清ALT和AST值，用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測血清中NF-kB、TNF-α水平。肝組織常規(guī)石蠟包埋，切片做HE染色和免疫組化染色（SABC法），觀察肝組

3、織病理變化和NF-kB、TNF-α的表達(dá)和分布。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠血清ALT、AST值比較：實驗第7天和第14天，模型組與對照組和干預(yù)組與模型組比較血清ALT值和AST值均有明顯變化；模型組第7天與第14天比較血清ALT和AST值明顯升高。
　　2.病理學(xué)檢查：HE染色結(jié)果：實驗第7天與第14天，對照組肝小葉結(jié)構(gòu)正常；第7天模型組肝細(xì)胞腫脹，中央靜脈周圍肝細(xì)胞可見大小不等的脂肪變性，部分處可見點狀壞死，炎癥細(xì)胞

4、浸潤；第7天干預(yù)組肝細(xì)胞脂肪變性減輕，未見壞死，炎癥細(xì)胞浸潤減輕；第14天模型組肝細(xì)胞可見灶狀壞死，炎癥細(xì)胞浸潤增多；第14天干預(yù)組偶見點狀壞死，炎癥細(xì)胞浸潤增較模型組明顯減少。
　　3.免疫組化染色結(jié)果
　?。?） NF-kB主要在中央靜脈周圍肝細(xì)胞呈陽性表達(dá)，實驗第7天和第14天，模型組與對照組比較陽性面積百分比明顯增高，干預(yù)組與模型組比較陽性面積百分比明顯降低；模型組第14天與第7天比較面積百分比明顯增高。
　　

5、（2） TNF-α主要在中央靜脈周圍肝細(xì)胞呈陽性表達(dá)，實驗第7天和第14天，模型組與對照組比較陽性面積百分比明顯增高；干預(yù)組與模型組比較陽性面積百分比明顯降低；模型組第14天與第7天比較面積百分比明顯增高。
　?。?）肝組織中TNF-α的表達(dá)與NF-kB表達(dá)呈正相關(guān)。
　　4.大鼠血清NF-kB水平和TNF-α水平比較
　?。?）實驗第7天和第14天，對照組與模型組和模型組與干預(yù)組比較血清NF-kB水平和血清TNF-α

6、水平均有明顯變化。實驗第7天與第14天模型組比較血清NF-kB和TNF-α水平明顯升高。
　?。?）實驗第7天和第14天，模型組血清NF-kB和TNF-α水平呈正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1、在大鼠急性酒精性肝損傷中PDTC能有效阻斷NF-kB的活化；
　　2、在大鼠急性酒精性肝損傷中NF-kB和TNF-α在肝組織中的表達(dá)和血清中的含量都呈正相關(guān)關(guān)系；
　　3、 NF-kB可通過激活TNF-α在大鼠急性酒精性