新生鼠實驗性缺氧缺血性損傷腦組織MCP-1及其受體CCR2的表達與小膠質細胞活化規(guī)律的研究.pdf

1、目的 觀察新生鼠實驗性缺氧缺血性腦損傷(HIBD)后腦組織中趨化因子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)及其受體CCR2mRNA水平及蛋白質水平的表達變化，觀察小膠質細胞在HIBD后不同時間點的活化規(guī)律，探討免疫學機制在HIBD發(fā)生發(fā)展中的作用。 方法采用結扎7d齡SD大鼠右側頸總動脈并暴露于8％氧氣環(huán)境2.5小時制作HIBD模型，用TaqMan實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應方法，動態(tài)定量監(jiān)測腦組織中MCP-1與CCR2mRNA在H

2、IBD后不同時間點表達的變化；免疫組化和WesternBlotting方法檢測MCP-1與CCR2在HIBD后不同時間點蛋白質水平的表達變化；應用ED1單克隆抗體及免疫熒光技術對缺氧缺血性損傷時小膠質細胞的活化規(guī)律進行研究。 結果1、HIBD后6h右側腦組織MCP-1mRNA表達至高峰，顯著高于對照組(p＜0.05)，12h組仍明顯升高(p＜0.05)，3d降至接近對照組水平(p＞0.05)。2、在HIBD后6h～24h，MCP

3、-1染色陽性細胞在右側大腦皮質及海馬區(qū)腦組織中的表達強度均顯著高于對照組，并在12h達高峰，24h仍保持較高水平表達(p均＜0.05)。在海馬區(qū)域，HIBD后3h即有較為明顯的陽性細胞出現(xiàn)。 3、右側腦組織CCR2mRNA水平于HIBD后24h達高峰，3d仍高于對照組(p＜0.05)，7d恢復至對照組水平(p＞0.05)。4、HIBD12h后CCR2蛋白表達量較對照組升高，24h達高峰，24h～3d保持較高水平表達(p＜0.05

4、)。 5、HIBD后12h右側大腦皮質及海馬區(qū)腦組織中激活的小膠質細胞數(shù)量開始增多，24小時至3d保持高水平表達(p＜0.05)，3d后開始下降；在海馬區(qū)域，HIBD后12h即有較明顯的小膠質細胞浸潤。在局灶性壞死區(qū)內活化小膠質細胞密集分布。 結論1、新生鼠HIBD時，MCP-1及其受體CCR2的mRNA及蛋白質水平表達顯著增高，對照組動物無明顯變化。提示MCP-1和CCR2可能參與了缺氧缺血性腦損傷的發(fā)生機制。