中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶和trappin-2蛋白在銀屑病中表達(dá)及功能的研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶和trappin2蛋白在銀屑病中表達(dá)及功能的研究姓名：閻衡申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：皮膚病與性病學(xué)指導(dǎo)教師：郝飛20080501第三軍醫(yī)大學(xué)博七學(xué)位論文泌，通過降解NE有效地抑制NE活性。trappin一2在正常皮膚不表達(dá)，而表達(dá)于炎癥性皮膚病及某些皮膚腫瘤。已證實trappin2可以促進(jìn)KC及腫瘤細(xì)胞的分化，是KC及某些腫瘤分化的標(biāo)志蛋白。Tr印pin一2通過有效抑制NE活性，間接抑制細(xì)胞增殖

2、，同時還能夠直接抑制某些腫瘤細(xì)胞的增殖。Trappin一2在肺損傷等疾病中發(fā)揮抗炎作用，能夠減少IL6、IL一8等細(xì)胞因子的釋放，可以作為抑制過度炎癥反應(yīng)的有效手段。由此可見，NE和trappin一2間的平衡對增殖和炎癥反應(yīng)具有重要的作用。目前關(guān)于NE和trappin2在銀屑病中的作用及其與銀屑病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系尚未見系統(tǒng)的研究報道。因此我們擬通過研究NE和trappin一2在銀屑病中的表達(dá)，以及兩者在銀屑病增殖及炎癥異常中的調(diào)控作用，探

3、討NE和trappin2在銀屑病發(fā)病過程中的作用機制，從而部分闡明銀屑病的發(fā)病機制，研究結(jié)果還對尋求銀屑病新的治療靶位和方法具有一定的指導(dǎo)意義。二、方法與結(jié)果1通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)對NE和trappin一2在尋常型銀屑病和膿皰型銀屑病血清及皮損組織液中的表達(dá)水平進(jìn)行定量研究。結(jié)果表明銀屑病血清及皮損中NE和trappin一2水平均明顯高于健康對照組(P001)，其中尋常型銀屑病血清中NE和trappin一2水平與病情活動相

4、關(guān)，Pg口雕D聆相關(guān)系數(shù)分別等于O，632、O541，P值均O01。雖然膿皰型銀屑病中NE水平顯著高于尋常型銀屑病組，trappin一2表達(dá)水平卻并未相應(yīng)增高，NE與trappin一2的表達(dá)水平間存在失衡現(xiàn)象。2為了證實NE和trappin一2參與了銀屑病的增殖調(diào)控，我們構(gòu)建了trappin一2真核表達(dá)載體p瓜ES2一EGFP—trappin2，用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染人HeLa細(xì)胞，獲得trappin一2高表達(dá)上清(97ng／m1)，再將NE和

5、trappin一2高表達(dá)上清作用于HaCaT細(xì)胞和銀屑病跨膜模型。MTT和3HTdR摻入試驗結(jié)果均表明NE可以明顯促進(jìn)HaCaT細(xì)胞的增殖(PO01)，在一定濃度范圍內(nèi)隨著NE濃度增高，其促增殖作用逐漸增強。NE的強效抑制劑西維來司鈉(sivelestat)可有效阻斷NE的促增殖作用。免疫組化染色證實10Iu／LNE可增強銀屑病跨膜模型磁67和p53表達(dá)水平(Po01或PO05)。表明NE在銀屑病中具有明顯的促增殖作用。另外，高表達(dá)tr