中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶及其抑制劑對(duì)大鼠腦出血作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的： 腦出血(intracerebralhemorrhage,ICH)是指非外傷性的腦實(shí)質(zhì)內(nèi)出血，是嚴(yán)重危害老年人的一種常見(jiàn)病、多發(fā)病，且發(fā)病率、死亡率和致殘率都很高，是急性腦血管病中的危重類(lèi)型，腦出血性卒中占全部腦卒中的1O％～25％[1]。腦出血時(shí)，除了血腫的占位性病變外，患者還會(huì)出現(xiàn)一系列繼發(fā)性腦損傷，如腦水腫、缺血、炎癥反應(yīng)、血腫周?chē)M織能量代謝紊亂及氧自由基損傷[2～3]。由于腦出血病理生理機(jī)制復(fù)雜，病因?qū)W尚未

2、完全清楚，多數(shù)患者仍然以內(nèi)科保守治療為主，至今還沒(méi)有特效的治療方法[4-5]。研究證實(shí)，中性粒細(xì)胞與腦缺血／再灌注(ischemia-reperfusion，IR)后的繼發(fā)性腦損傷有密切聯(lián)系[6~81。大腦在腦缺血／再灌注后中性粒細(xì)胞被激活，可釋放多種蛋白水解酶，其中中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(neutropilelastase，NE)是中性粒細(xì)胞釋放的一種重要的絲氨酸蛋白水解酶，可以降解基底膜和其它重要的細(xì)胞間基質(zhì)[9]，能增加細(xì)胞因子的產(chǎn)

3、生㈣、黏附分子表達(dá)…】，和腦組織水腫也密切相關(guān)。 西維來(lái)司鈉(sivelestatsodium)是一種小分子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑，能選擇性地抑制彈性蛋白酶，目前主要用于急性肺損傷的治療[12]。實(shí)驗(yàn)證明，西維來(lái)司鈉不僅在體外能抑制彈性蛋白酶引起的肺血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)蛋白通透性的增加，而且靜脈滴注能抑制彈性蛋白酶引起的大鼠的出血性肺損傷。在各種急性肺損傷模型中，預(yù)防性或治療性靜脈滴注西維來(lái)司鈉均能夠改善肺泡出血、蛋白滲出及肺血管

4、通透性增加等病理改變。近年國(guó)外有報(bào)道西維來(lái)司鈉能夠改善腦缺血／再灌注引起的腦水腫、腦損傷及炎癥反應(yīng)【13】。也能改善脊索損傷引起的腦內(nèi)的炎癥反應(yīng)、減少神經(jīng)元損傷㈣。但西維來(lái)司鈉對(duì)腦出血引起的腦組織損傷是否有保護(hù)作用，目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。由于腦出血與腦缺血引起的腦組織損傷有許多相似之處，都有腦組織的炎癥、水腫以及局部腦血流的變化。我們可以推測(cè)，西維來(lái)司鈉可能對(duì)腦出血也具有保護(hù)作用。 本研究的目的旨在從行為學(xué)、神經(jīng)病理學(xué)和神經(jīng)

5、生化三個(gè)方面，來(lái)探討NE的含量和腦出血關(guān)系以及西維來(lái)司鈉對(duì)大鼠腦出血模型的保護(hù)作用及其機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)方法： 采用尾狀核微量注射膠原酶所誘導(dǎo)大鼠ICH模型，觀察ICH大鼠腦組織內(nèi)NE含量、腦含水量的動(dòng)態(tài)變化；觀察西維來(lái)司鈉對(duì)ICH大鼠的行為學(xué)改變、腦組織病理改變、腦含水量變化的影響；觀察西維來(lái)司鈉對(duì)NF—KB表達(dá)、MPO活性以及NO及NE含量的影響。 結(jié)果和結(jié)論： 1．ICH大鼠腦組織NE含量明顯增加，6h即

6、升高，24h達(dá)最高峰，以后逐漸下降；ICH大鼠腦組織含水量也明顯升高，48h達(dá)高峰，兩者呈正相關(guān)。NE的增加是腦水腫形成的主要原因之一。 2．西維來(lái)司鈉能促進(jìn)ICH大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀的改善；減輕腦水腫及病理?yè)p傷，呈劑量依賴性。表明西維來(lái)司鈉對(duì)膠原酶所引起的ICH大鼠腦組織有保護(hù)作用。 3．西維來(lái)司鈉能減少I(mǎi)CH大鼠腦組織內(nèi)NE含量和NF—KB的過(guò)量表達(dá)；阻止MPO活性的增加及NO含量的增多。表明西維來(lái)司鈉是通過(guò)這幾個(gè)機(jī)