Stejnihagin抑制L-型鈣通道活性的研究.pdf

1、蛇毒金屬蛋白酶(SVMPs)屬于金屬蛋白酶M12家族中的reprolysin亞家族。目前為止已經(jīng)報(bào)道的SVMPs的序列超過(guò)200個(gè)，來(lái)源于40余種不同的毒蛇，大部分蛇毒金屬蛋白酶引起出血作用，屬于出血毒素；小部分屬于非出血毒素。 SVMPs主要功能為凝血，特別是凝血前/抗凝血作用，因此也被稱為凝血因子。最近的證據(jù)表明SVMPs還與細(xì)胞凋亡以及炎癥反應(yīng)相關(guān)。目前為止還沒有關(guān)于SVMPs對(duì)于作用于離子通道的相關(guān)報(bào)道。 與其他

2、類型的電壓依賴性鈣離子通道一樣，L-型電壓依賴性鈣離子通道是由5個(gè)非同源性的亞基組成：α1，α2，β，γ，δ。α1亞基是L-型鈣離子通道的主要功能性亞基，但是他們功能的調(diào)節(jié)受到其他輔助性亞基的調(diào)節(jié)。α1亞基分子量約為190-250kDa，為鈣通道中最大的亞基，其主要功能是膜電壓感受器、第二信使和藥物以及毒素結(jié)合的靶點(diǎn)區(qū)，并通透鈣離子，決定了鈣通道的激活、失活以及藥理學(xué)特性。 竹葉青蛇毒經(jīng)過(guò)兩步柱層析可純化得到一個(gè)組分Stejni

3、hagin，包含Stejnihagin-A和Stejnihagin-B兩種毒素蛋白，兩者具有86％的序列同源性，均屬于PⅢ金屬蛋白酶。在此研究中，利用離體血管和全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，研究了Stejnihagin對(duì)于血管收縮以及L-型鈣通道(VGCC)的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Stejinihagin可以阻斷A7r5細(xì)胞上L-型鈣電流，其IC50約為37nM：并且可以阻斷60mMK+溶液引起的血管收縮。此外，酶活性試驗(yàn)還證明，阻斷鈣通道的活性與金屬蛋