L-型鈣通道阻滯劑下調(diào)鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶信號(hào)通路阻滯慢性缺氧右心室肥大.pdf

1、　　目的：許多研究證實(shí)L-型鈣通道阻滯劑能夠預(yù)防和治療慢性缺氧右心室肥大，且近年來發(fā)現(xiàn)鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(Calcineurin，CaN)信號(hào)通路是調(diào)控心室肥大的重要通路，但該信號(hào)通路在慢性缺氧右心室肥大中的作用目前不清楚，因此我們研究CaN信號(hào)通路在慢性缺氧大鼠右心室肥大中的作用以及L-型鈣通道阻滯劑——苯磺酸氨氯地平(商品名為絡(luò)活喜Norvasc)對(duì)該信號(hào)通路的影響，以進(jìn)一步明確L-型鈣通道阻滯劑預(yù)防慢性缺氧右心室肥大的機(jī)制。

2、方法：1.建立慢性持續(xù)缺氧致右心室肥大的大鼠模型：大鼠置于正常氣壓下行慢性持續(xù)缺氧(9.5﹪-10.5﹪O2)14天。模型建立成功的標(biāo)準(zhǔn)為：右心室/(左心室+室間隔)[RV/(LV+S)]、右心室/體重(RV/BW)的比值較正常對(duì)照組明顯增高(P＜0.05)。2.實(shí)驗(yàn)分組和處理：本實(shí)驗(yàn)分兩批完成實(shí)驗(yàn)，每批大鼠30只，均按照隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)分為3個(gè)組，即慢性缺氧組、苯磺酸氨氯地平片(30mg.kg-1.d-1，管飼法喂入)處理組、正常對(duì)照組。

3、處理組和慢性缺氧組暴露于正常氣壓下行慢性持續(xù)缺氧(9.5﹪-10.5﹪O2)21天。3.21天后處死第一批大鼠檢測(cè)：①RV/(LV+S)，RV/BW；②使用鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶活性測(cè)定試劑盒測(cè)定右心室組織CaN活性；③使用半定量RT-PCR檢測(cè)鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶Aβ(CnAβ)mRNA的表達(dá)、心臟肌球蛋白β重鏈(β-MHC)mRNA的表達(dá)；④使用Western-blot檢測(cè)CnAβ、活化T細(xì)胞的核因子3(NFAT3)和β-MHC蛋白的表達(dá)。21天