澤瀉防治泌尿系結(jié)石有效部位工藝及藥理學(xué)研究.pdf

1、目的：在前期國家自然科學(xué)基金（No: 39970891）研究的基礎(chǔ)上，初步確定澤瀉防治泌尿系結(jié)石有效部位為提取物中的總?cè)瞥煞帧１疚膽?yīng)用大孔吸附樹脂分離純化澤瀉藥材中的三萜類化學(xué)成分，使其含量達(dá)到50％以上，其標(biāo)示量成分23-乙酰澤瀉醇B含量達(dá)到1.29％以上，并通過藥效學(xué)實驗進(jìn)一步確證該有效部位為防治泌尿系結(jié)石的活性部位。 方法與結(jié)果： 1.建立了澤瀉有效部位中總?cè)频暮繙y定方法。以藥材中含量最高的三萜類23-乙酰澤

2、瀉醇B為對照品，用5％香草醛-冰醋酸溶液，高氯酸顯色，在554nm波長處測定樣品吸收度。實驗表明23-乙酰澤瀉醇B在23.80～142.8ug線性范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，其回歸方程為Y=0.0055x-0.0512，r=0.9996。該方法操作簡便，結(jié)果穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，可作為澤瀉藥材質(zhì)量監(jiān)控的有效手段。 2.建立了澤瀉有效部位中23-乙酰澤瀉醇B的HPLC-ELSD含量測定方法。以23-乙酰澤瀉醇B為對照品，應(yīng)用HPLC-ELSD

3、對澤瀉有效部位中23-乙酰澤瀉醇B的含量測定進(jìn)行了方法學(xué)考察。結(jié)果表明在23-乙酰澤瀉醇B進(jìn)樣量在0.1384ug～0.6920ug之間時線性關(guān)系良好，其回歸方程為：Y=494467X-4426.9,r=0.9999。加樣回收率為99.97％,RSD為2.680％。精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性實驗也均符合要求。 3.建立了澤瀉防治泌尿系結(jié)石有效部位的制備方法。首先優(yōu)化了澤瀉有效部位的提取工藝，以23-乙酰澤瀉醇B含量為指標(biāo)對提取工藝進(jìn)

4、行優(yōu)化，經(jīng)正交實驗考察，確定最佳提取工藝為：70％乙醇、用量為10倍量、提取3次、每次1.5h。繼而對大孔吸附樹脂分離富集有效部位的工藝進(jìn)行了篩選及優(yōu)化。澤瀉浸膏用一定量50％乙醇溶解后，上樣于D型大孔吸附樹脂，充分吸附后，再用一定量蒸餾水，30％乙醇，90％乙醇依次洗脫，收集90％乙醇洗脫液，蒸干溶劑，干燥，即為所得。以23-乙酰澤瀉醇B為對照品計算，富集產(chǎn)物中總?cè)祁惡靠蛇_(dá)50％以上，23-乙酰澤瀉醇B含量可達(dá)1.290％以上。實

5、驗表明：D型大孔吸附樹脂適合分離純化澤瀉中極性較小的三萜類成分。 4.探討中藥澤瀉總?cè)朴行Р课辉隗w外對草酸鈣結(jié)晶形成的影響，并初步確定其抑制草酸鈣結(jié)石形成的有效部位。應(yīng)用種晶技術(shù)檢測澤瀉不同濃度的總?cè)铺崛∥镌隗w外對一水草酸鈣晶體生長指數(shù)（I.I）。結(jié)果表明澤瀉總?cè)平喔?、低劑量組的草酸鈣晶體生長抑制指數(shù)高達(dá)87.75％。中藥澤瀉總?cè)铺崛∥锬苊黠@抑制草酸鈣晶體的生長，是澤瀉抑制草酸鈣結(jié)石形成的有效部位，對該部位的有效化學(xué)活