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1、目的:以顯脈金花茶(Camellia euphlebia Merr.ex Sealy)葉為研究對(duì)象,分離分析其石油醚提取部位和氯仿提取部位及乙酸乙酯提取部位的化學(xué)成分,并利用GC-MS技術(shù)對(duì)顯脈金花茶葉脂溶性成分進(jìn)行了定性分析,在化學(xué)研究之后,選擇山奈酚作為含量測(cè)定指標(biāo),建立了測(cè)定顯脈金花茶葉中山奈酚的HPLC分析方法,為顯脈金花茶葉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供了方法和依據(jù),本研究對(duì)進(jìn)一步合理開發(fā)和利用該植物資源具有重大的意義。
方法:
2、顯脈金花茶干燥葉用95%乙醇回流法提取得到乙醇總提取物,用系統(tǒng)溶劑分離法分得其極性不同的石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位和水飽和正丁醇部位;采用硅膠吸附色譜法、減壓硅膠柱層析、重結(jié)晶法等現(xiàn)代分離方法和技術(shù)對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行分離和純化,對(duì)分得的單體化合物利用理化檢驗(yàn)及UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS等波譜方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定;將顯脈金花茶葉石油醚部位經(jīng)柱層析分離得到油狀流份,以氫氧化鉀-甲醇溶液進(jìn)行甲酯化處理后利用氣相色譜-質(zhì)譜
3、聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)分別對(duì)它們的脂溶性成分進(jìn)行分離和鑒定。采用利用高效液相色譜法測(cè)定顯脈金花茶葉中山奈酚的含量。
結(jié)果:從顯脈金花茶葉中石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位分離得到10個(gè)化合物,鑒定了7個(gè)化合物,分別為:β-谷甾醇(β-sitosterol),α-菠菜甾醇(α-spinasterol),正三十四醇(n-tetratriacontanol),β-香樹素(β-amyrin),齊墩果酸(oleanic acid),o
4、libanumol-L,山奈酚(kaempferol),采用GC-MS聯(lián)用法對(duì)顯脈金花茶葉石油醚部位的脂溶性成分進(jìn)行了分離鑒定,結(jié)果分離鑒定了其中的20個(gè)組分。HPLC法測(cè)定顯脈金花茶中山奈酚的含量,山奈酚在0.10μg-0.40μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均回收率為99.84%(RSD=1.59%),測(cè)得山奈酚的含量為0.3182-0.3640mg/g。
結(jié)論:從顯脈金花茶葉提取物中共分離了10個(gè)化合物,鑒定了7個(gè),其中5個(gè)為
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