抑瘤素M在膝關節(jié)骨關節(jié)炎中的表達.pdf

1、目的:
　　 骨關節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是一種常見的多因素疾病,其發(fā)病趨勢隨著年齡的增加而遞增。骨關節(jié)炎的病因復雜,發(fā)病機制尚不明確。近年來的研究主要著眼于在全身或局部因素的作用下,關節(jié)內(nèi)各種細胞因子表達失衡,導致關節(jié)軟骨的退行性變和繼發(fā)性骨質(zhì)增生。在已知的細胞因子中,主要由白細胞介素-1(IL-1)和白細胞介素-6(IL-6)是炎癥發(fā)病的重要調(diào)節(jié)劑,介導OA的發(fā)病過程。抑瘤素M(oncostatin M,O

2、SM)是IL-6蛋白家族中的一員,在骨重建中可調(diào)節(jié)成骨細胞及破骨細胞活性。目前國內(nèi)對OSM在腫瘤與類風濕疾病中的作用研究已有報道,但是OSM在OA中的作用及機制研究尚有爭議。本研究通過檢測OSM在OA滑膜組織中的表達差異,探討其在骨關節(jié)炎發(fā)病中的作用。
　　 材料和方法:
　　 1、選取51例行全膝關節(jié)置換術(shù)或關節(jié)鏡手術(shù)中獲取的關節(jié)滑膜組織。依據(jù)骨關節(jié)炎診斷標準,參照X線片Altman和Ahiback X線分級法分為三組

3、:A組:嚴重OA組,33例(33膝),男8例(8膝),女25例(25膝),47～75歲,平均58.9歲,膝關節(jié)病變X線分級3級以上;B組:輕微OA組,10例(10膝),男1例(1膝),女9例(9膝),42～58歲,平均49.3歲,病程3年以下,膝關節(jié)病變X線分級1-2級;C組:對照組,8例盤狀半月板患者為正常對照組,8例(8膝),男4例(4膝),女4例(4膝),16～24歲,平均18.9歲。
　　 2、收集的每例標本分為兩份,其

4、中一份放入-80℃冰箱保存?zhèn)溆?另一份立即用4％多聚甲醛固定。取-80℃保存的滑膜組織標本約5mm×5mm×5mm大小,用Trizol—步法提取組織中的總RNA,然后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,以GAPDH為內(nèi)參,采用實時定量PCR技術(shù)(q RT-PCR)擴增目的基因和內(nèi)參基因。經(jīng)4％多聚甲醛固定的滑膜標本48小時后常規(guī)脫水、透明、包蠟,然后切片機切成5μm厚的組織切片。兩步法免疫組化檢測各組滑膜組織中OSM的表達情況。
　　 結(jié)果:<

5、br>　　 應用相對定量分析法測得各組OSM的表達量,輕微病變組基因表達水平高于對照組差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);病變嚴重組OSM基因表達明顯增多,與輕微病變組、對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。免疫組化中,OSM在骨關節(jié)炎病變嚴重組、輕微病變組膝關節(jié)滑膜組織中滑膜細胞、血管內(nèi)皮細胞、單核細胞和/或淋巴細胞均有陽性表達,表現(xiàn)為細胞膜和/或細胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒,在正常的膝關節(jié)滑膜細胞中也有少量表達。嚴重病變組及輕微病變組