鼻咽原發(fā)性淋巴瘤的臨床病理特征及Epstein-Barr病毒感染狀況.pdf

1、背景：EB病毒(Epstein—Barr virus，EBV)與霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma，HL)及多種非霍奇金淋巴瘤(non—Hodgkin lymphoma，NHL)有關。廣州地區(qū)是EBV相關性惡性腫瘤——鼻咽癌的高發(fā)區(qū)，該地區(qū)鼻咽原發(fā)性淋巴瘤的發(fā)病情況及其與EBV感染的關系是一個值得探討的課題。按照2008年WHO造血與淋巴組織腫瘤的分類標準，鼻咽原發(fā)性淋巴瘤的免疫表型構成特征如何，目前尚未見報道。 E

2、BV在世界范圍內廣泛流行，而與EBV密切相關的結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤的發(fā)病卻與鼻咽癌一樣具有很強的地域及人種傾向。迄今為止，國內外學者對鼻咽癌EBV的序列變異已進行了較為廣泛的研究，然而，有關結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤EBV序列變異的研究卻不多。 目的: 1.按照2008年WHO造血與淋巴組織腫瘤的分類標準，對廣州地區(qū)鼻咽原發(fā)性淋巴瘤的發(fā)病情況、臨床特點及免疫表型進行回顧性分析研究； 2.探討各種免疫表型與E

3、BV感染的關系及患者血清抗EBV抗體水平的特點； 3.對鼻咽結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤EBV LMP1基因及F片段的變異類型及其伴隨的點突變進行初步的研究探討，尋找其變異的特點。 方法: 1.回顧性分析2001年1月至2008年9月中山大學腫瘤防治中心病理科診斷的109例連續(xù)的鼻咽原發(fā)性淋巴瘤的臨床資料； 2.收集所有病例的蠟塊，切片作一系列免疫組織化學染色進行免疫表型分型； 3.運用EBV編碼的

4、小RNA(EBERs)原位雜交檢測各種免疫表型EBV的感染情況： 4.分析鼻咽原發(fā)性淋巴瘤患者的血清EBV VCA—IgA和EA—IgA滴度特點； 5.從石蠟包埋組織中抽提DNA，采用聚合酶鏈反應(PCR)、巢式PCR及限制性內切酶酶切分析及核酸序列分析等方法研究鼻咽結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤EBV LMP1基因及F片段的變異類型及其伴隨的點突變。 結果: 1.鼻咽原發(fā)性淋巴瘤的發(fā)病情況及臨床病理特征

5、 1.1鼻咽原發(fā)性淋巴瘤占所有結外淋巴瘤的10.9％(109/1005)。男女比為2.03：1(73/36)，中位發(fā)病年齡為55歲(12-81歲)，其中彌漫大B細胞淋巴瘤(DLBCL)發(fā)病較結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤晚11年(中位發(fā)病年齡分別為61.5歲和50.5歲)(p<0.05)。 1.2鼻咽原發(fā)性淋巴瘤常見的癥狀包括：頸部腫塊(62/109，56.9％)、鼻塞(41/109，37.6％)、耳鳴(23/109，21.1％

6、)、涕血(21/109，19.3％)、頭痛(12/109，11.0％)、聽力下降(11/109，10.1％)。18.4％(20/109)患者伴有“B”癥狀，其中結外鼻型NK/T淋巴瘤患者(8/18，44.4％)較DLBCL患者(9/56，16.1％)常見(p<0.05)。 1.3 Ann Arbor分期Ⅰ/Ⅱ期患者占78.0％(85/109)，Ⅲ/Ⅳ期僅占22.0％(24/109)。首診時腫物局限于鼻咽部和(或)其周圍結構的病例

7、僅占17.4％(19/109)，82.6％(90/109)病例伴有淋巴結和(或)遠處結外器官的侵犯，其中以頸部淋巴結的侵犯最為常見(81/109)，而顱神經侵犯罕見(2/109)。34.3％(23/67)患者血清乳酸脫氫酶(Lactic acid dehydrogenase，LDH)高于正常水平(>245u/L)。國際預后指數(International Prognostic Index，IPI)明確的共65例，83.1％(54/65)

8、病例具有0-2個危險因素，16.9％(11/65)具有3-5個危險因素。 1.4鼻咽原發(fā)性淋巴瘤的95.4％(104/109)為NHL，HL僅占4.6％(5/109)。B—NHL和T—NHL分別占NHL的75.0％(78/104)和25.0％(26/104)。78例B—NHL中，56例為DLBCL，占71.8％，其中包括1例老年人EB病毒陽性DLBCL和1例富于T細胞/組織細胞DLBCL；其余22例B—NHL分別為髓外漿細胞瘤(

9、6例)、套細胞淋巴瘤(5例)、粘膜相關組織結外邊緣區(qū)淋巴瘤(MALT淋巴瘤)(3例)、小淋巴細胞淋巴瘤(3例)、濾泡性淋巴瘤(2例)、Burkitt淋巴瘤(2例)和ALK陽性的大B細胞淋巴瘤(1例)。26例T—NHL中，18例為結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤，占69.2％；其余8例T—NHL分別為非特殊型外周T細胞性淋巴瘤(6例)、ALK陽性的間變大細胞淋巴瘤(1例)和T淋巴母細胞性淋巴瘤(1例)。5例HL均為經典型HL，其中4例為混合細胞

10、型HL，1例為淋巴細胞豐富型HL。 1.5鼻咽原發(fā)性DLBCL(非特殊型)又可分為CD5陽性DLBCL、生發(fā)中心B細胞樣(GCB)和非生發(fā)中心B細胞樣(non—GCB)三種亞型，分別占7.7％(4/52)、15.4％(8/52)和76.9％(40/52)。依據腫瘤細胞是否表達CD56，結外鼻型 NK/T細胞淋巴瘤分為 TIA-1+/EBERs+/CD56+和TIA-1+/EBERs+/CD56-兩種亞型，分別占55.6％(10/

11、18)和44.4％(8/18)。16例可檢測的結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤中，全部呈CD8陽性，其中5例同時伴有CD4的表達。6例(6/16，37.5％)結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤呈p53過表達(超過40％的腫瘤細胞表達p53)。EB病毒LMP1的表達率為50％(8/16)。 2.EBERs原位雜交及患者血清EB病毒VCA—IgA和EA—IgA檢測結果 2.1鼻咽原發(fā)性NHL EBERs的陽性率為20.2％(21/104)

12、，HL則為60％(3/5)。T—NHL EBERs的陽性率為69.2％(18/26)，而B—NHL僅為3.8％(3/78)。18例(100％)結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤均呈EBERs陽性，其余8例T—NHL均呈EBERs陰性。56例DLBCL中，僅2例2008年WHO單獨列出的DLBCL(老年人EB病毒陽性DLBCL及富于T細胞/組織細胞DLBCL各1例)呈EBERs陽性，其余54例DLBCL(非特殊型)均呈EBERs陰性。6例髓外漿細

13、胞瘤中，1例呈EBERs陽性，其余16例B—NHL，包括2例Burkitt淋巴瘤均呈EBERs陰性。 2.2鼻咽結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤患者血清VCA—IgA(≥1：40)和EA—IgA(≥1：10)陽性率分別為50％(6/12)和25％(3/12)，幾何平均滴度(Geometric mean titers，GMT). 3.鼻咽原發(fā)性淋巴瘤的預后及其影響因素 3.1可追訪的65例鼻咽NHL患者隨訪時間4～92個

14、月，平均隨訪時間為27個月。中位生存時間為45.7個月，2年和5年總生存率分別為60.0％和48.0％。 3.2 Kaplan—Meier生存分析顯示：B—NHL的5年生存率(53.0％)高于T—NHL(33.0％)(P<0.05)。IPI0～2個危險因素組2年生存率(66.0％)高于3～5個危險因素組(36.0％)(p<0.05). 4.516例鼻咽結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤中，9例可同時擴增出LMP1 C端、LMP1

15、 N端和BamHI F片段，發(fā)現DNA序列變異的組合類型有3種，即del—LMP1(Gly335)/XhoI—loss/F(6/9，66.7％)、del—LMP1(Asp335)/ XhoI—loss/“f”(2/9，22.2％)、del—LMP1(Asp335)/wt—XhoI“f”(1/9，11.1％)。 結論: 1.廣州地區(qū)鼻咽原發(fā)性淋巴瘤并不少見，占結外淋巴瘤的10.9％。首診時病灶局限于鼻咽部的病例少見(占17

16、.4％)，大部分病例(74.3％)同時伴有頸部淋巴結的累及。 2.鼻咽原發(fā)性淋巴瘤絕大部分為NHL，HL罕見。NHL以B—NHL為主，其中大部分為DLBCL；結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤則占T—NHL的大多數。 3.鼻咽結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤均感染EB病毒，其他類型的NHL與EB病毒關系不大。 4.EB病毒陰性的鼻咽NHL患者血清EBV溶解期抗體水平可升高，可能與體內潛伏感染的EB病毒在機體免疫力下降時被再激活

17、有關。 5.鼻咽結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤EB病毒del—LMP1 aa335的點突變率及BamHI F片段BamHI“f”的變異率均低于文獻報道的鼻咽癌。本研究結果顯示，del—LMP1 aa335點突變的有無與BamHI F片段的變異類型存在關聯性。 6.鼻咽結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤EB病毒LMP1基因和F片段序列變異的最常見組合類型是del—LMP1(Gly335)/XhoI—loss/F。該EB病毒變異型與結外