血小板活化因子受體拮抗劑對(duì)內(nèi)毒素血癥幼年大鼠腸屏障功能保護(hù)作用的研究.pdf

1、小兒胃腸功能障礙是指消化食物、吸收營養(yǎng)和排泄廢物的任何一個(gè)環(huán)節(jié)受損所致的臨床綜合征，其臨床表現(xiàn)為：在危重病癥的基礎(chǔ)上出現(xiàn)腹脹，腸鳴音消失，嘔吐咖啡樣液體，嘔血和黑便等，常預(yù)示病情加重和預(yù)后不良。其病因除胃腸系統(tǒng)本身的疾病外，多見于嚴(yán)重感染、創(chuàng)傷、休克、燒傷和窒息等危重癥。早在20世紀(jì)80年代就有學(xué)者提出“胃腸道是多系統(tǒng)器官功能衰竭(multiplesystemorganfailure，MSOF)的始動(dòng)器官”，說明胃腸功能障礙在危重病發(fā)展

2、過程中的重要性。 嚴(yán)重感染是兒科危重癥中胃腸功能障礙的常見病因之一，其發(fā)病機(jī)制與內(nèi)毒素血癥和腸屏障功能破壞密切相關(guān)。胃腸道黏膜的損傷會(huì)引起腸道通透性增加、腸道細(xì)菌和內(nèi)毒素移位、釋放大量炎性介質(zhì)等，其結(jié)果可能導(dǎo)致膿毒癥、遠(yuǎn)隔器官損傷，最終導(dǎo)致MSOF。腸黏膜受損最早的表現(xiàn)就是通透性增加，早在腸黏膜形態(tài)學(xué)出現(xiàn)明顯變化之前，腸通透性增高已經(jīng)發(fā)生，故腸黏膜通透性增高可反映早期腸屏障的損傷。腸黏膜通透性增高，為腸腔內(nèi)毒素及其它毒素吸收入血

3、提供了機(jī)會(huì)，也是腸道細(xì)菌移位的病理基礎(chǔ)。防止細(xì)菌移位的屏障由以下幾部分構(gòu)成：①腸道連續(xù)的黏膜上皮構(gòu)成的機(jī)械屏障；②由腸道淋巴樣組織細(xì)胞網(wǎng)提供的細(xì)胞及體液免疫系統(tǒng)；③正常的、大量的腸道厭氧菌群，防止致病微生物的過度增生及在腸道黏膜的定植。其中任一部分或幾部分遭到破壞，都會(huì)造成細(xì)菌移位，因此腸道屏障功能備受學(xué)者關(guān)注。腸黏膜的機(jī)械屏障由腸表面黏液、微絨毛、腸黏膜上皮細(xì)胞及其間的緊密連接以及黏膜的特殊結(jié)構(gòu)組成。腸上皮細(xì)胞間連接由緊密連接、黏附連

4、接、縫隙(橋粒)連接等構(gòu)成。構(gòu)成腸上皮細(xì)胞間連接的蛋白主要有ZO-1、occludin、cadherin、claudin和β-catenin等。這些分子直接或間接地與多種細(xì)胞內(nèi)蛋白，特別是骨架蛋白連接構(gòu)成上皮細(xì)胞的緊密連接和黏附連接，主要功能是作為選擇性的細(xì)胞間屏障，調(diào)節(jié)各種分子和離子的擴(kuò)散。 近年來血小板活化因子(plateletactivatingfactor，PAF)在胃腸黏膜損害中的作用日益受到重視。研究認(rèn)為PAF在諸多

5、參與胃腸黏膜損害的炎癥介質(zhì)中可能起到“中心放大”的介導(dǎo)作用。新生鼠腹腔注射PAF可引起腸損傷。腹腔注射LPS，能誘發(fā)腸組織產(chǎn)生內(nèi)源性PAF。PAF很可能是內(nèi)毒素作用的主要效應(yīng)因子，已有實(shí)驗(yàn)證實(shí)，用PAF和LPS引起的壞死性小腸結(jié)腸炎的改變相似，用PAF受體拮抗劑WEB2170可明顯減輕LPS所致的腸壞死。國內(nèi)吳勝群通過對(duì)MODS患者外周血PAF受體mRNA的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，LPS不僅可以造成PAF分泌增加，而且可以造成外周血淋巴細(xì)胞PAF受體

6、mRNA表達(dá)量明顯升高。PAF可導(dǎo)致急性胰腺炎時(shí)腸黏膜屏障功能損傷，導(dǎo)致細(xì)菌移位，應(yīng)用PAF受體拮抗劑BB-882可減輕腸道屏障功能損傷，抑制細(xì)菌移位。因此，內(nèi)毒素通過上調(diào)胃腸道PAF受體的表達(dá)及刺激PAF產(chǎn)生，使胃腸及全身各器官產(chǎn)生功能障礙。 已證實(shí)PAF參與了胃潰瘍、壞死性小腸結(jié)腸炎、缺血性胃和小腸黏膜損傷，那么在內(nèi)毒素血癥腸損傷中PAF是如何發(fā)揮作用的?PAF是否通過損傷腸屏障功能進(jìn)而引起腸功能紊亂?PAF發(fā)揮其生物學(xué)活性

7、是通過與細(xì)胞組織中的PAF受體(PAFR)結(jié)合而實(shí)現(xiàn)的。本文應(yīng)用18日齡幼年大鼠內(nèi)毒素血癥模型，從小腸上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變及腸損傷指標(biāo)DAO、免疫屏障功能指標(biāo)sIgA和連接蛋白ZO-1、E-cadherin、β-catenin的改變，并應(yīng)用PAF受體拮抗劑對(duì)以上幾方面的影響，通過PAF受體拮抗劑對(duì)腸屏障功能的保護(hù)作用，探討PAF在內(nèi)毒素血癥腸損傷中的作用機(jī)制，并為臨床胃腸功能障礙的治療提供理論依據(jù)。 經(jīng)研究得出結(jié)論： 1

8、.應(yīng)用PAF受體拮抗劑BN52021可減輕幼鼠大體、腸道病理學(xué)及透射電鏡下超微結(jié)構(gòu)損傷，減輕腸水腫，使體重變化幅度減小，死亡率下降，保護(hù)腸黏膜屏障功能，提示PAF在幼年大鼠內(nèi)毒素血癥模型腸損傷中發(fā)揮重要作用。 2.因血漿和小腸組織中DAO活性同步變化，因此測(cè)定血漿DAO活性可早期、敏感地反映小腸黏膜功能的破壞。 3.幼鼠內(nèi)毒素血癥模型中腸道上皮細(xì)胞連接蛋白ZO-1、E-cadherin及β-catenin蛋白表達(dá)及mRN

9、A水平均明顯降低，應(yīng)用PAF受體拮抗劑BN52021可減輕ZO-1、E-cadherin及β-catenin下降程度，提示PAF可能通過破壞腸道機(jī)械屏障功能在內(nèi)毒素血癥腸損傷中發(fā)揮一定作用。預(yù)防和治療性應(yīng)用PAF受體拮抗劑可通過減輕上皮細(xì)胞連接蛋白的下降而保護(hù)腸屏障功能。 4.內(nèi)毒素血癥時(shí)sIgA明顯降低，預(yù)防和治療性應(yīng)用PAF受體拮抗劑可以通過減緩sIgA下降而減輕腸損傷，提示PAF在腸黏膜的免疫屏障功能損傷的發(fā)生機(jī)制中發(fā)揮一