白首烏苷B抗腫瘤作用及其作用機制研究.pdf

1、目的：
　?、購陌资诪蹩傑罩蟹蛛x白首烏苷 B(以下簡稱 CGB)。
　?、谕ㄟ^體內、體外抗腫瘤試驗考察CGB對多種瘤株的抑制作用。
　?、塾^察CGB對荷瘤小鼠免疫作用及體外誘導腫瘤細胞的凋亡作用，探討其抗腫瘤作用的部分機制。
　　方法：
　?、俨捎弥鶎游龇蛛x制備CGB，并采用高效液相色譜分析CGB的化學組成。
　?、诓捎肕TT比色法、生長曲線法及細胞形態(tài)學觀察CGB對B-16、K-562、PC-3、H

2、ela、RM-1、SGC-7901、HepG2和A-549腫瘤細胞的增殖抑制能力。
　?、鄄捎肏-22、S-180、B-16和RM-1荷瘤小鼠模型，觀察CGB對各模型小鼠移植性腫瘤抑制作用。
　?、芡ㄟ^觀察荷瘤小鼠T淋巴細胞增殖能力及NK細胞活性，考察CGB對S-180荷瘤小鼠免疫增強作用。
　　⑤采用DNA瓊脂糖凝膠電泳觀察特異性凋亡梯狀條帶；流式細胞儀檢測細胞周期變化和凋亡率；RT-PCR檢測凋亡p53 mRNA的

3、表達，以觀察CGB誘導PC-3凋亡的作用。
　　結果：
　?、購陌资诪蹩傑罩蟹蛛x得到CGB6.9g(3.0％)。
　?、?CGB對B-16、K-562、PC-3、Hela、RM-1、SGC-7901、HepG2和A-549腫瘤細胞均有抑制作用，IC50分別為10.0±0.4、23.1±1.3、34.8±2.4、41.6±6.4、48.8±2.3、53.1±2.7、71.3±5.2、103.0±6.5μg/ml，且具有明

4、顯的劑量-效關系，生長曲線法表明CGB對PC-3和HepG2腫瘤細胞的作用隨著給藥濃度的增加而增強，且在一定的劑量范圍內隨著時間的增加其對兩種腫瘤細胞的作用增強，具有明顯的量-效和時-效關系。細胞形態(tài)觀察到CGB能使細胞密度明顯降低，細胞皺縮，部分懸浮，細胞碎片增多。
　　③ CGB組對小鼠移植性S-180和H-22腫瘤的抑制率隨著濃度的升高而增加，有明顯的量-效關系。160mg/kg CGB劑量組對小鼠移植性S-180和H-22

5、腫瘤抑瘤率分別達到46.1±3.3％和37.0±1.4％，具有明顯的抗腫瘤作用(P<0.01)。在同等劑量下，CGB對小鼠移植性B-16和RM-1腫瘤抑瘤率分別為21.5％和0％，分別與模型組比較無明顯差異。
　?、蹸GB組與模型組比較，T淋巴細胞增殖率和NK細胞殺傷率明顯增大(P<0.05)，且T淋巴細胞增殖率和NK細胞殺傷率：CGB給藥組>模型組>CTX對照組。
　?、?PC-3細胞 DNA瓊脂糖凝膠電泳沒有明顯的凋亡梯

6、度。FCM結果顯示：較正常對照組，CGB組 PC-3細胞出現(xiàn)了明顯的亞二倍體峰，細胞凋亡百分率與正常對照組細胞相比均有極顯著差異(P<0.01)，在一定時間范圍內，CGB對PC-3細胞的促凋亡作用具有時-效關系，細胞周期G0/G1期有所升高。RT-PCR結果顯示：與正常對照組比較，CGB組PC-3細胞p53mRNA基因表達增加(P<0.05)。
　　結論：
　　① CGB對多種體外生長的腫瘤細胞及小鼠移植性腫瘤均有抑制作用，